रशियामध्ये, सध्या, एचआयव्ही संसर्गाच्या प्रयोगशाळेच्या निदानाची मानक प्रक्रिया आहे एचआयव्हीसाठी अँटीबॉडीज शोधणेएंजाइम इम्युनोसे वापरणेत्यानंतर प्रतिक्रियेतील त्यांच्या विशिष्टतेची पुष्टी होते रोगप्रतिकारक डाग.

संसर्ग झाल्यानंतर 3 महिन्यांच्या आत संक्रमित झालेल्यांपैकी 90-95% मध्ये एचआयव्हीचे प्रतिपिंडे दिसतात, 5-9% मध्ये - संसर्गाच्या क्षणापासून 6 महिन्यांनंतर आणि 0.5-1% मध्ये - नंतरच्या तारखेला. ऍन्टीबॉडीज शोधण्याची सर्वात जुनी वेळ संसर्गाच्या क्षणापासून 2 आठवडे आहे.

एचआयव्हीसाठी अँटीबॉडीज शोधण्यात 2 चरणांचा समावेश होतो. पहिल्या टप्प्यावरएचआयव्ही प्रतिजनांच्या विरूद्ध प्रतिपिंडांचे एकूण स्पेक्ट्रम विविध चाचण्या वापरून शोधले जाते: एन्झाईम इम्युनोसे, एग्ग्लुटिनेशन, एकत्रित, कंगवा, झिल्ली-फिल्टर किंवा पडदा-डिफ्यूज. दुसऱ्या टप्प्यावरइम्युनोब्लोटिंगचा वापर व्हायरसच्या वैयक्तिक प्रथिनांसाठी प्रतिपिंड निर्धारित करण्यासाठी केला जातो. कामात, रशियन फेडरेशनच्या आरोग्य मंत्रालयाद्वारे वापरण्यासाठी परवानगी असलेल्या चाचणी प्रणालींचा वापर करण्यास परवानगी आहे. निदान प्रक्रिया योग्य चाचण्यांच्या वापरासाठी मंजूर सूचनांनुसारच केल्या पाहिजेत.

रक्ताचे नमुने घेणे क्यूबिटल शिरापासून स्वच्छ, कोरड्या चाचणी ट्यूबमध्ये 3-5 मिली प्रमाणात तयार केले जाते. नवजात मुलांकडून कॉर्ड रक्त घेतले जाऊ शकते. प्राप्त केलेली सामग्री (संपूर्ण रक्त) खोलीच्या तपमानावर 12 तासांपेक्षा जास्त आणि 4-8 डिग्री सेल्सिअस तापमानात रेफ्रिजरेटरमध्ये 1 दिवसापेक्षा जास्त काळ ठेवण्याची शिफारस केलेली नाही. आगामी हेमोलिसिस विश्लेषणाच्या परिणामांवर परिणाम करू शकते. सेंट्रीफ्यूगेशनद्वारे किंवा पाश्चर विंदुक किंवा काचेच्या रॉडने टेस्ट ट्यूबच्या भिंतीवर रक्त ट्रेस करून सीरम वेगळे केले जाते. वेगळे केलेले सीरम स्वच्छ (शक्यतो निर्जंतुकीकरण) चाचणी ट्यूब, कुपी किंवा प्लास्टिक कंटेनरमध्ये हस्तांतरित केले जाते आणि या स्वरूपात ते 4-8 डिग्री सेल्सियस तापमानात 7 दिवसांपर्यंत साठवले जाऊ शकते. काम करत असताना, तुम्ही 5 जुलै 1990 रोजी "एड्स निदान प्रयोगशाळांमध्ये महामारीविरोधी शासनाच्या सूचना" क्रमांक 42-28/38-90 मध्ये दिलेल्या सुरक्षा नियमांचे पालन केले पाहिजे.

एचआयव्हीच्या एकूण प्रतिपिंडांचे निर्धारण.

प्रथम सकारात्मक परिणाम प्राप्त झाल्यानंतर, विश्लेषण आणखी 2 वेळा (समान सीरमसह आणि त्याच चाचणी प्रणालीमध्ये) केले जाते. जर किमान एक सकारात्मक परिणाम प्राप्त झाला (तीन ELISA चाचण्यांपैकी दोन सकारात्मक परिणाम), सीरम संदर्भ प्रयोगशाळेत पाठविला जातो.

संदर्भ प्रयोगशाळेत, प्राथमिक पॉझिटिव्ह सेरा (म्हणजे, ज्यांनी पहिल्या चाचणी प्रणालीमध्ये दोन सकारात्मक परिणाम दिले आहेत) पुष्टीकरणासाठी निवडलेल्या दुसऱ्या (इतर) चाचणी प्रणालीमध्ये ELISA मध्ये पुन्हा तपासले जातात.

दुसऱ्या चाचणी प्रणालीमध्ये विश्लेषणाचा सकारात्मक परिणाम मिळाल्यानंतर, सीरमची आयएसमध्ये तपासणी करणे आवश्यक आहे.

दुसऱ्या चाचणी प्रणालीमध्ये नकारात्मक परिणाम प्राप्त झाल्यास, तिसऱ्या चाचणी प्रणालीमध्ये सीरमची पुन्हा तपासणी केली जाते.

दुसर्‍या आणि तिसर्‍या दोन्ही चाचणी प्रणालींमध्ये नकारात्मक चाचणी परिणाम प्राप्त झाल्यास, एचआयव्हीच्या प्रतिपिंडांच्या अनुपस्थितीवर एक निष्कर्ष जारी केला जातो.

जेव्हा तिसऱ्या चाचणी प्रणालीमध्ये सकारात्मक परिणाम प्राप्त होतो, तेव्हा सीरम देखील रोगप्रतिकारक ब्लॉटिंगमध्ये विश्लेषणासाठी पाठविला जातो.

रोगप्रतिकारक डाग.

नायट्रोसेल्युलोज झिल्लीवर स्थिर असलेल्या विषाणूच्या विशिष्ट प्रथिनांचे प्रतिपिंड शोधणे हे या पद्धतीचे तत्त्व आहे. HIV-1 च्या लिफाफा प्रथिने (env) यांना सामान्यतः ग्लायकोप्रोटीन्स ("gp" किंवा "gp") असे संबोधले जाते, आण्विक वजन किलोडाल्टन (cd) मध्ये व्यक्त केले जाते: 160 kd, 120 kd, 41 kd. HIV-2 मध्ये ग्लायकोप्रोटीनचे वजन 140 kd, 105 kd, 36 kd असते. HIV-1 मधील कोर प्रथिने (गॅग) (सामान्यत: प्रथिने - "p" किंवा "r" म्हणून ओळखले जाते) यांचे आण्विक वजन अनुक्रमे 55 kd, 24 kd, 17 kd आणि HIV-2 -56 kd, 26 kd आहे. , 18 kd. HIV-1 (pol) एन्झाइमचे आण्विक वजन 66 kd, 51 kd, 31 kd, HIV-2-68 kd असते.

इम्युनोब्लोटिंग परिणामांचे अर्थ सकारात्मक, अनिश्चित आणि नकारात्मक असे केले जातात.

सकारात्मक(पॉझिटिव्ह) नमुने मानले जातात ज्यामध्ये 2 किंवा 3 एचआयव्ही ग्लायकोप्रोटीन्सचे प्रतिपिंड आढळतात.

नकारात्मक(नकारात्मक) हे सेरा आहेत जे एचआयव्हीच्या कोणत्याही प्रतिजनांना (प्रथिने) प्रतिपिंडे शोधत नाहीत.

एचआयव्ही ग्लायकोप्रोटीन आणि/किंवा कोणत्याही एचआयव्ही प्रथिनांना प्रतिपिंडे शोधणारे नमुने मानले जातात संशयास्पद(अपरिभाषित किंवा अव्याख्यात).

जेव्हा HIV-1 प्रतिजनांसह रोगप्रतिकारक ब्लॉटमधील कोर प्रोटीन्स (गॅग) च्या प्रतिपिंडांसह अनिश्चित परिणाम प्राप्त होतो, तेव्हा HIV-2 प्रतिजनांसह चाचणी केली जाते.

इम्यून ब्लॉटिंगचे सकारात्मक परिणाम प्राप्त झाल्यानंतर, चाचणी सामग्रीमध्ये एचआयव्हीच्या प्रतिपिंडांच्या उपस्थितीबद्दल निष्कर्ष काढला जातो.

नकारात्मक चाचणी परिणाम प्राप्त झाल्यानंतर, IB एक निष्कर्ष काढते की HIV साठी कोणतेही प्रतिपिंडे नाहीत.

अनिश्चित परिणाम प्राप्त झाल्यानंतर (जर p24 प्रतिजन आढळले नाही), एचआयव्हीच्या प्रतिपिंडांसाठी 3 महिन्यांनंतर वारंवार चाचण्या केल्या जातात,

आणि आणखी 3 महिन्यांनंतर अनिश्चित परिणाम राखताना. जर p24 प्रतिजन आढळले असेल तर, पहिला अनिश्चित परिणाम प्राप्त झाल्यानंतर 2 आठवड्यांनंतर दुसरी तपासणी केली जाते.

जर, पहिल्या तपासणीनंतर 6 महिन्यांनंतर, अनिश्चित परिणाम पुन्हा प्राप्त झाले, आणि रुग्णाला संसर्ग आणि एचआयव्ही संसर्गाच्या क्लिनिकल लक्षणांसाठी जोखीम घटक नसल्यास, परिणाम चुकीचा सकारात्मक मानला जातो. (एपिडेमियोलॉजिकल आणि क्लिनिकल संकेत असल्यास, विहित केल्यानुसार सेरोलॉजिकल अभ्यासांची पुनरावृत्ती केली जाते).

रीकॉम्बीनंट व्हायरस-विशिष्ट पॉलीपेप्टाइड्स "एचआयव्ही ब्लॉट" वापरून इम्यून ब्लॉटिंग ओळखले जाते की ते स्वतः व्हायरल प्रथिने वापरत नाहीत, परंतु रीकॉम्बिनंट पॉलीपेप्टाइड्स - एचआयव्ही प्रतिजन ("Env1", "Gag1", "पोल", "Env2" चे analogues. "). रीकॉम्बिनंट Env1 पॉलीपेप्टाइड थेट HIV-1 gp120 आणि gp41, Gag1 पॉलीपेप्टाइड ते p17 आणि p24 प्रतिजन, Po11 पॉलीपेप्टाइड ते p51 प्रतिजन, Env2 पॉलीपेप्टाइड ते HIV-2 gp110 आणि gp38 प्रतिजनांना थेट शोधते. जर ते Env1 किंवा Env2 किंवा दोन्ही Env (HIV प्रकार 1 आणि 2 दुहेरी संसर्ग) सह प्रतिक्रिया देत असेल तर सीरम सकारात्मक मानले जाते. केवळ पोल आणि गॅगसह प्रतिक्रिया हा अनिश्चित परिणाम मानला जातो, ज्या प्रकरणात एचआयव्ही लाइसेट वापरून क्लासिक इम्युनोब्लॉटच्या अनिश्चित परिणामांच्या प्रकरणांप्रमाणेच फॉलो-अप केला जातो.

एचआयव्ही बाधित मातांपासून जन्मलेल्या मुलांमध्ये एचआयव्ही संसर्गाच्या सेरोलॉजिकल निदानाची वैशिष्ठ्ये म्हणजे आयुष्याच्या पहिल्या 6-12 महिन्यांत संक्रमित आणि संक्रमित नसलेल्या दोन्ही मुलांमध्ये माता उत्पत्तीच्या एचआयव्हीसाठी प्रतिपिंडे असतात, जी नंतर अदृश्य होऊ शकतात. मुलामध्ये एचआयव्ही संसर्गाची उपस्थिती दर्शविणारा निकष म्हणजे 18 महिने किंवा त्याहून अधिक वयाच्या एचआयव्हीच्या प्रतिपिंडांचा शोध. एचआयव्ही बाधित आईच्या पोटी जन्मलेल्या १८ महिन्यांच्या मुलामध्ये एचआयव्हीच्या प्रतिपिंडांची अनुपस्थिती हा एचआयव्ही संसर्गाविरूद्धचा निकष आहे.

वर्णन

निर्धाराची पद्धतइम्युनोब्लॉट.

अभ्यासाधीन साहित्यसीरम

गृहभेटी उपलब्ध

अँटिन्यूक्लियर ऍन्टीबॉडीज हे ऑटोअँटीबॉडीजचे एक कुटुंब आहे जे रिबोन्यूक्लीक ऍसिड आणि त्यांच्याशी संबंधित प्रथिनांना बांधतात. ते डिफ्यूज संयोजी ऊतक रोग असलेल्या 90% पेक्षा जास्त रुग्णांमध्ये आढळतात आणि बहुतेकदा स्वयंप्रतिकार यकृत रोग आणि इतर अनेक परिस्थितींमध्ये देखील आढळतात. आजपर्यंत, ऑटोअँटीबॉडीजच्या या कुटुंबातील सुमारे 200 वाणांचे वैशिष्ट्य आहे, परंतु त्या सर्वांचा उपयोग क्लिनिकल प्रॅक्टिसमध्ये केला जाऊ शकत नाही.

अँटीन्यूक्लियर ऍन्टीबॉडीजचा इम्युनोब्लॉट एकाच वेळी 15 मुख्य प्रकारच्या ऍन्टीन्यूक्लियर ऍन्टीबॉडीजचा एका चाचणीमध्ये अभ्यास करण्यास परवानगी देतो, ज्यामुळे मुख्य प्रणालीगत संधिवाताच्या रोगांचे विभेदक निदान सुनिश्चित होते. इम्युनोब्लॉटद्वारे आढळलेल्या प्रत्येक प्रकारचे ऑटोअँटीबॉडी सामान्यत: वैशिष्ट्यपूर्ण क्लिनिकल चित्र असलेल्या रूग्णांमध्ये आढळतात, म्हणून ऑटोअँटीबॉडीजचा स्पेक्ट्रम केवळ रोगाचे निदान करू शकत नाही तर काही क्लिनिकल अभिव्यक्ती विकसित होण्याचा धोका देखील स्थापित करतो.

अँटीन्यूक्लियर ऍन्टीबॉडीजचा एक इम्युनोब्लॉट सेरोलॉजिकल तपासणीच्या दुसर्या टप्प्यावर वापरण्याचा सल्ला दिला जातो ज्यामध्ये इतर चाचण्यांचा सकारात्मक परिणाम दिसून येतो ज्यात विषयाच्या सीरममध्ये अँटीन्यूक्लियर ऍन्टीबॉडीजची उपस्थिती दर्शविली जाते. या चाचण्यांमध्ये अँटीन्यूक्लियर ऍन्टीबॉडीजचे निर्धारण (ELISA स्क्रीनिंग), Hep2 पेशींवर ऍन्टीन्यूक्लियर फॅक्टर (ANF) शोधणे, ऍन्टीन्यूक्लियर ऍन्टीबॉडीज आणि एक्सट्रॅक्टेबल न्यूक्लियर ऍन्टीजेन (ENA,) च्या ऍन्टीबॉडीजचा समावेश होतो.

प्रणालीगत संधिवाताच्या रोगांच्या निदानामध्ये अँटीन्यूक्लियर ऍन्टीबॉडीजची इम्युनोब्लॉट पद्धत उच्च क्लिनिकल विशिष्टतेद्वारे दर्शविली जाते. परंतु एएनएफ () च्या उच्च टायटर्समध्ये देखील अँटीन्यूक्लियर ऍन्टीबॉडीजची विशिष्टता नेहमीच स्थापित करणे शक्य नसते, कारण अनेक अँटीन्यूक्लियर ऍन्टीबॉडी ऍन्टीजेन्स अजूनही अप्रमाणित राहतात. या प्रकरणात नकारात्मक इम्युनोब्लॉट परिणाम प्रणालीगत संधिवाताच्या रोगांचे निदान वगळत नाही. इम्युनोब्लॉट वापरून अनेक अँटीन्यूक्लियर अँटीबॉडीज शोधल्या जाऊ शकतात - मायोसिटिस-विशिष्ट ऑटोअँटीबॉडीज () आणि इम्युनोब्लॉट - स्क्लेरोडर्मा () मधील ऑटोअँटीबॉडीजचे पॅनेल.

साहित्य

1. लॅपिन एस.व्ही. टोटोल्यान ए.ए. स्वयंप्रतिकार रोगांचे इम्यूनोलॉजिकल प्रयोगशाळा निदान / प्रकाशन गृह "चेलोवेक", सेंट पीटर्सबर्ग - 2010. 272 ​​पी.
2. नासोनोव्ह ई.एल., अलेक्झांड्रोव्हा ई.एन. संधिवात रोगांच्या प्रयोगशाळेच्या निदानासाठी आधुनिक मानके. क्लिनिकल मार्गदर्शक तत्त्वे / BHM, M - 2006.
3. कॉनराड के, श्लोस्लर डब्ल्यू., हिपे एफ., फिट्झलर एम.जे. ऑर्गन स्पेसिफिक ऑटोइम्यून डिसीजमध्ये ऑटोअँटीबॉडीज: ए डायग्नोस्टिक रेफरन्स/ PABST, ड्रेस्डेन - 2011. 300 p.
4. कॉनराड के, श्लोस्लर डब्ल्यू., हिपे एफ., फिट्झलर एम.जे. सिस्टमिक ऑटोइम्यून डिसीजमध्ये ऑटोअँटीबॉडीज: एक निदान संदर्भ/ PABST, ड्रेसडेन - 2007. 300 p.
5. Gershvin ME, Meroni PL, Shoenfeld Y. Autoantibodies 2nd ed./ Elsevier Science - 2006. 862 p.
6. शोनफेल्ड वाई., सेर्व्हेरा आर, गेर्शविन एमई डायग्नोस्टिक क्रायटेरिया इन ऑटोइम्यून डिसीजेस / ह्युमना प्रेस - 2008. 598 पी.
7. अभिकर्मक किट सूचना.

प्रशिक्षण

शेवटच्या जेवणानंतर 4 तास सहन करणे अधिक श्रेयस्कर आहे, कोणत्याही अनिवार्य आवश्यकता नाहीत.

नियुक्तीसाठी संकेत

खालील अटींचे निदान आणि विभेदक निदानासाठी चाचणी दर्शविली जाते:

• प्रणालीगत ल्युपस एरिथेमॅटोसस;
• त्वचेखालील ल्युपस आणि इतर प्रकारचे त्वचेचे ल्युपस;
• मिश्रित संयोजी ऊतक रोग;
• Sjögren's सिंड्रोम आणि संबंधित रोग;
• डिफ्यूज आणि स्थानिक स्क्लेरोडर्मा, CREST सिंड्रोम;
• दाहक मायोपॅथी (पॉलिमियोसिटिस आणि डर्माटोमायोसिटिस);
• किशोर तीव्र संधिवात;
• स्वयंप्रतिकार हिपॅटायटीस;
• प्राथमिक पित्तविषयक सिरोसिस आणि स्क्लेरोसिंग पित्ताशयाचा दाह;
• अँटीन्यूक्लियर फॅक्टर, अँटीन्यूक्लियर ऍन्टीबॉडीज, एक्सट्रॅक्टेबल न्यूक्लियर ऍन्टीजनचे ऍन्टीबॉडीज, डीएनएचे ऍन्टीबॉडीज, न्यूक्लियोसोम्सचे ऍन्टीबॉडीज आणि ऍन्टीफॉस्फोलिपिड ऍन्टीबॉडीजचे उच्च टायटर्स शोधताना या चाचणीचा वापर सूचित केला जातो.

परिणामांची व्याख्या

चाचणी परिणामांच्या स्पष्टीकरणामध्ये उपस्थित डॉक्टरांसाठी माहिती असते आणि ती निदान नसते. या विभागातील माहिती स्व-निदान किंवा स्व-उपचारांसाठी वापरली जाऊ नये. या परीक्षेचे निकाल आणि इतर स्त्रोतांकडून आवश्यक माहिती या दोन्हींचा वापर करून डॉक्टरांनी अचूक निदान केले आहे: इतिहास, इतर परीक्षांचे निकाल इ.

मोजमापाची एकके: गुणात्मक चाचणी, परिणाम "शोधला" किंवा "सापडला नाही" च्या स्वरूपात सादर केला जातो.

जेव्हा कोणत्याही प्रकारच्या अँटीबॉडीची उपस्थिती दर्शविणारा बँड आढळतो, तेव्हा बँडच्या रंगाची तीव्रता प्रत्येक ओळखलेल्या प्रकारच्या प्रतिपिंडांसाठी प्लसस ("क्रॉस") च्या संख्येनुसार वर्णन केली जाते. सकारात्मकतेच्या प्रमाणात वाढ अप्रत्यक्षपणे ऑटोअँटीबॉडीजची सामग्री आणि आत्मीयता दर्शवते.

संदर्भ मूल्ये: Sm, RNP/Sm, SS-A (60 kDa), SS-A (52 kDa), SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENP-B, dsDNA, हिस्टोन, न्यूक्लियोसोमसाठी प्रतिपिंडे , Rib P, AMA-M2, Jo-1 आढळले नाहीत.

ऑटोअँटीबॉडीजच्या निर्धाराचा परिणाम प्रत्येक संबंधित प्रतिजनासाठी "क्रॉस" मध्ये सादर केला जातो. सेरोपॉझिटिव्हिटीच्या प्रमाणात वाढ अप्रत्यक्षपणे ऑटोअँटीबॉडीजची सामग्री आणि आत्मीयता दर्शवते. सेरोपॉसिटिव्हिटी स्कोअर पर्याय खाली सूचीबद्ध आहेत:

1. प्रतिपिंडे सापडले नाहीत.
2. +/- - सीमारेषा परिणाम;
3. + - विशिष्ट प्रतिजनासाठी स्वयंप्रतिपिंडांची कमी सामग्री;
4. ++ ही विशिष्ट प्रतिजनासाठी ऑटोअँटीबॉडीजची सरासरी सामग्री आहे;
5. +++ - विशिष्ट प्रतिजनासाठी ऑटोअँटीबॉडीजची उच्च सामग्री.

न्यूक्लियर ऍन्टीबॉडीज शोधण्याशी संबंधित मुख्य रोग:

प्रतिजन	अर्थ
स्म (स्मिथ)	सिस्टेमिक ल्युपस एरिथेमॅटोसससाठी विशिष्ट मार्कर (अमेरिकन कॉलेज ऑफ रूमॅटोलॉजी, ACR च्या SLE साठी 10 व्या निकषात समाविष्ट आहे)
SS-A (Ro52)	हे विविध स्वयंप्रतिकार रोगांमध्ये नोंदवले जाते, अधिक वेळा सिस्टेमिक ल्युपस एरिथेमॅटोसस आणि त्याचे त्वचेचे स्वरूप, प्रणालीगत संधिवात रोग, संधिवात, स्वयंप्रतिकार यकृत रोग इ.
SS-A (Ro60)	सिस्टेमिक ल्युपस एरिथेमॅटोसस, ल्युपस एरिथेमॅटोससचे त्वचेचे स्वरूप, सिस्टेमिक ल्युपस एरिथेमॅटोससमधील प्रकाशसंवेदनशीलता, जन्मजात ल्युपस एरिथेमॅटोसस आणि गर्भाच्या हृदयविकाराचा उच्च धोका. Sjögren's सिंड्रोम मधील मुख्य सेरोलॉजिकल सूचक. हे सहसा SS-A (Ro52) प्रतिजनाच्या प्रतिपिंडांसह नोंदवले जाते.
एसएस-बी	स्जोग्रेन सिंड्रोम, सिस्टेमिक ल्युपस एरिथेमॅटोसस.
PCNA	सिस्टेमिक ल्युपस एरिथेमॅटोसस, ल्युपस नेफ्रायटिसचा धोका.
रिबोसोम्स (रिबो पी)	सिस्टेमिक ल्युपस एरिथेमॅटोसस, मध्यवर्ती मज्जासंस्थेला नुकसान होण्याचा धोका.
न्यूक्लियोसोम्स	सिस्टेमिक ल्युपस एरिथेमॅटोसस, ल्युपस ग्लोमेरुलोनेफ्राइटिसचा उच्च धोका.
दुहेरी अडकलेला डीएनए	सिस्टेमिक ल्युपस एरिथेमॅटोससचे विशिष्ट मार्कर (एसएलई एसीआरच्या 10 व्या निकषात समाविष्ट), ल्युपस नेफ्रायटिसचा उच्च धोका.
snRNP/Sm	मिश्रित संयोजी ऊतक रोग, सिस्टेमिक ल्युपस एरिथेमॅटोसस, किडनीच्या नुकसानाचा कमी धोका, स्क्लेरोडर्मा.
हिस्टोन्स	सिस्टेमिक ल्युपस एरिथेमॅटोसस, ड्रग-प्रेरित ल्युपस, स्क्लेरोडर्मा.
Scl-70	त्वचा आणि अंतर्गत अवयवांच्या पसरलेल्या जखमांसह सिस्टेमिक स्क्लेरोसिस.
PM-Scl	पॉलीमायोसिटिससह स्क्लेरोडर्मा.
CENP-B	क्रेस्ट सिंड्रोम विथ स्क्लेरोडॅक्टीली, टेलांगिएक्टेसिया, त्वचेखालील कॅल्सिफिकेशन, रेनॉड सिंड्रोम, एसोफॅगिटिस.
जो-१	पॉलीमायोसिटिस अँटीसिंथेटेस सिंड्रोमच्या स्वरूपात.
AMA-M2	प्राथमिक पित्तविषयक सिरोसिस, स्जोग्रेन सिंड्रोम.

इम्युनोब्लॉटिंग (इम्युनोब्लॉट) ही एक अत्यंत विशिष्ट आणि अत्यंत संवेदनशील संदर्भ पद्धत आहे जी सकारात्मक किंवा अनिश्चित चाचणी परिणाम प्राप्त झालेल्या रुग्णांच्या निदानाची पुष्टी करते. RPGA किंवा ELISA वापरून .

वैयक्तिक रोगजनक प्रतिजैविकांना ऍन्टीबॉडीज शोधण्याची ही पद्धत नायट्रोसेल्युलोज झिल्लीवरील ELISA वर आधारित आहे, ज्यावर जेल इलेक्ट्रोफोरेसीसद्वारे विभक्त केलेल्या वेगळ्या बँडच्या स्वरूपात विशिष्ट प्रथिने लागू केली जातात. विशिष्ट प्रतिजनांविरुद्ध प्रतिपिंडे असल्यास, संबंधित स्ट्रिप लोकसवर गडद रेषा दिसते. इम्युनोब्लॉटची विशिष्टता त्याच्या उच्च माहिती सामग्री आणि प्राप्त परिणामांच्या विश्वासार्हतेमध्ये आहे.

संशोधन साहित्यमानवी सीरम किंवा प्लाझ्मा आहे. एका पट्टीवरील संशोधनासाठी, 1.5-2 मिली रक्त किंवा 15-25 μl सीरम आवश्यक आहे.

डब्ल्यूएचओच्या शिफारशीनुसार, एचआयव्ही संसर्गाचे निदान करण्यासाठी इम्युनोब्लॉटिंग (वेस्टर्न ब्लॉट) अतिरिक्त तज्ञ पद्धत म्हणून वापरली जाते, ज्याने एलिसाच्या परिणामांची पुष्टी केली पाहिजे. ही पद्धत सहसा सकारात्मक ELISA निकाल तपासण्यासाठी वापरली जाते, कारण ती अधिक जटिल आणि महाग असली तरी अधिक संवेदनशील आणि विशिष्ट मानली जाते.

इम्युनोब्लोटिंग एंझाइम इम्युनोएसे (ELISA) आणि जेलमधील विषाणू प्रोटीनचे प्राथमिक इलेक्ट्रोफोरेटिक पृथक्करण आणि नायट्रोसेल्युलोज झिल्लीमध्ये त्यांचे हस्तांतरण एकत्र करते. इम्युनोब्लॉट प्रक्रियेमध्ये अनेक टप्पे असतात. प्रथम, त्याच्या घटक घटकांना पूर्व-शुद्ध आणि नष्ट केले जाते, एचआयव्ही इलेक्ट्रोफोरेसीसच्या अधीन आहे, तर विषाणू बनवणारे सर्व प्रतिजन आण्विक वजनाने वेगळे केले जातात. नंतर, ब्लॉटिंग करून, प्रतिजन जेलमधून नायट्रोसेल्युलोजच्या पट्टीमध्ये किंवा नायलॉन फिल्टरमध्ये हस्तांतरित केले जातात, ज्यामध्ये आता प्रथिनांचा स्पेक्ट्रम आहे जो एचआयव्हीचे वैशिष्ट्य आहे, डोळ्यांना अदृश्य आहे. पुढे, चाचणी सामग्री (सीरम, रुग्णाचा प्लाझ्मा इ.) पट्टीवर लागू केली जाते आणि जर नमुन्यात विशिष्ट ऍन्टीबॉडीज असतील तर ते त्यांच्याशी काटेकोरपणे अनुरूप असलेल्या प्रतिजन प्रथिनांच्या पट्ट्याशी बांधले जातात. त्यानंतरच्या हाताळणीचा परिणाम म्हणून (ELISA प्रमाणे), या परस्परसंवादाचा परिणाम व्हिज्युअलाइज्ड - दृश्यमान केला जातो. पट्टीच्या काही भागात पट्ट्यांची उपस्थिती कठोरपणे परिभाषित एचआयव्ही प्रतिजनांना प्रतिपिंडांच्या अभ्यासलेल्या सीरममध्ये उपस्थितीची पुष्टी करते.

एचआयव्ही संसर्गाच्या निदानाची पुष्टी करण्यासाठी इम्युनोब्लॉटिंगचा वापर सामान्यतः केला जातो. इम्युनोब्लोटिंगद्वारे कोणत्याही दोन एचआयव्ही लिफाफा प्रथिनांचे प्रतिपिंड आढळल्यास डब्ल्यूएचओ सेरा पॉझिटिव्ह मानते. या शिफारशींनुसार, लिफाफा प्रथिनेंपैकी फक्त एका प्रथिनेची (gp160, gp120, gp41) संयोगाने किंवा इतर प्रथिनांशी प्रतिक्रिया न आल्यास, परिणाम संशयास्पद मानला जातो आणि वेगळ्या किटचा वापर करून दुसऱ्या अभ्यासाची शिफारस केली जाते. मालिका किंवा दुसर्या कंपनीकडून. त्यानंतरही परिणाम संशयास्पद राहिल्यास, अभ्यास दर 3 महिन्यांनी सुरू राहतो.

वैशिष्ठ्य

इम्युनोब्लॉट विश्लेषण ही एक विश्वासार्ह पद्धत आहे जी तुम्हाला पहिल्या आणि दुसऱ्या प्रकारच्या एचआयव्ही प्रतिजनांना अँटीबॉडीजची उपस्थिती निर्धारित करण्यास अनुमती देते. जर एखाद्या व्यक्तीला संसर्ग झाला असेल तर, दोन आठवड्यांच्या आत अँटीबॉडीज दिसतात, ज्याचा बराच नंतर शोध घेतला जाऊ शकतो. एचआयव्हीचे वैशिष्ठ्य म्हणजे ऍन्टीबॉडीजची संख्या वेगाने वाढते आणि रुग्णाच्या रक्तात राहते. जरी ते उपस्थित असले तरीही, हा रोग दोन किंवा अधिक वर्षांपर्यंत प्रकट होऊ शकत नाही. एलिसा पद्धत नेहमीच रोगाची उपस्थिती अचूकपणे निर्धारित करत नाही, म्हणून, इम्युनोब्लोटिंग आणि पीसीआर वापरून परिणामांची पुष्टी करणे आवश्यक आहे जर इम्युनोएसे एंजाइम सकारात्मक असेल.

नियुक्तीसाठी संकेत

हे "इम्युनोब्लॉट" काय आहे हे आधीच शोधून काढले गेले आहे, परंतु हा अभ्यास कोणासाठी लिहून दिला आहे? इम्युनोब्लॉटिंगद्वारे मानवी इम्युनोडेफिशियन्सी व्हायरस (HIV) चाचण्या घेण्याचे कारण म्हणजे सकारात्मक ELISA परिणाम. ज्या रूग्णांवर शस्त्रक्रिया केली जाईल त्यांच्यासाठी एन्झाइम इम्युनोएसेद्वारे जाणे आवश्यक आहे. याव्यतिरिक्त, गर्भधारणेची योजना आखत असलेल्या स्त्रियांसाठी तसेच लैंगिक संबंध ठेवणाऱ्या प्रत्येकासाठी विश्लेषण केले पाहिजे. ELISA च्या परिणामांवर शंका असल्यास, HIV असलेल्या रुग्णांना इम्युनोब्लोटिंग नियुक्त करा.

डॉक्टरकडे जाण्याचे कारण खालील चिंताजनक लक्षणे असू शकतात:

• तीव्र वजन कमी होणे;
• कमकुवतपणा, काम करण्याची क्षमता कमी होणे;
• आतड्यांसंबंधी विकार (अतिसार) जो तीन आठवडे टिकतो;
• शरीराचे निर्जलीकरण;
• ताप;
• शरीरात सुजलेल्या लिम्फ नोड्स;
• कॅंडिडिआसिस, क्षयरोग, न्यूमोनिया, टॉक्सोप्लाझोसिस, नागीण वाढणे.

शिरासंबंधी रक्तदान करण्यापूर्वी रुग्णाला तयारी करण्याची गरज नाही. अभ्यासाच्या 8-10 तास आधी, आपण खाऊ शकत नाही. रक्तदानाच्या एक दिवस आधी अल्कोहोल आणि कॉफी पिणे, जड शारीरिक व्यायाम करणे, उत्साह अनुभवणे अशी शिफारस केलेली नाही.

संशोधन कसे केले जाते?

रुग्णाच्या दृष्टिकोनातून, इम्युनोब्लॉट इतर कोणत्याही विश्लेषणापेक्षा वेगळे नाही: शिरासंबंधी रक्त घेतले जाते, तपासणी केली जाते आणि परिणाम प्राप्त होतो. परंतु जर आपण तंत्राबद्दल थोडे अधिक तपशीलवार विचार केला तर ते फार सोपे नाही, परंतु तरीही ते शोधण्याचा प्रयत्न करा.

प्रथम, एक "संदर्भ" मानवी इम्युनोडेफिशियन्सी विषाणू अभिकर्मक उत्पादन संयंत्रात घेतला जातो. नंतर, जेल माध्यमात एक विशेष प्रक्रिया (इलेक्ट्रोफोरेसीस) वापरून, व्हायरस त्याच्या सर्वात लहान घटकांमध्ये नष्ट केला जातो: प्रथिने (व्हायरस प्रतिजन). मग, ब्लॉटिंगचा वापर करून (इंग्रजी ओलेतून), कण एका विशेष सामग्रीवर ठेवले जातात - नायट्रोसेल्युलोज किंवा नायलॉन फिल्टर, वापरण्यास तयार सूचक, तथाकथित पट्टी प्राप्त केली जाते. स्ट्रिप ही एक पट्टी आहे ज्यामध्ये प्रतिजन त्यांच्या आण्विक वजनावर अवलंबून वितरीत केले जातात, स्पष्ट अनुक्रमात, म्हणजे, एक विशिष्ट प्रथिने कागदाच्या प्रत्येक मिलीमीटरशी संबंधित असतात.

तुम्हाला माहिती असेल की, जर व्हायरस मानवी रक्तात असतील, तर शरीर त्यांच्या शेल (विशिष्ट प्रथिने) विरुद्ध प्रतिपिंड तयार करू लागते आणि प्रत्येक विषाणूचे स्वतःचे प्रतिजन प्रथिने असतात. रक्तातील प्रतिजन प्रथिनांना ऍन्टीबॉडीज शोधणे हा इम्युनोब्लॉट पद्धतीचा आधार आहे. शेवटी, जर अँटीबॉडी एखाद्या प्रतिजनशी टक्कर घेते, तर ते नक्कीच एकमेकांशी संवाद साधतील - ते "चिकटतात".

तर, प्रतिजन पट्टीच्या पट्टीवर असतात आणि चाचणी विषयाच्या रक्तात योग्य प्रतिजन असल्यास, ते एकमेकांशी संवाद साधतील आणि या ठिकाणी, पट्टीच्या पट्टीवर, एक निर्देशक दिसेल - एक सपाट दिसेल. (जसे गर्भधारणा चाचणी). शिवाय, पट्टीच्या विशिष्ट ठिकाणी, अशा प्रकारे डॉक्टरांना रक्तामध्ये विशिष्ट विषाणूचे वैशिष्ट्य असलेल्या प्रथिनांचा संच आहे की नाही हे समजेल.

तर, उदाहरणार्थ, प्रथिने स्थानिकीकरणाच्या ठिकाणी पट्टीवर गडदपणा असल्यास gp160, gp120, gp41एचआयव्हीचे निदान झाले आहे, इतर विषाणूंसाठी ते प्रथिनांचा पूर्णपणे भिन्न संच असेल.

हे लक्षात घ्यावे की इम्युनोब्लॉट आपल्याला व्हायरसची उपस्थिती अचूकपणे निर्धारित करण्यास अनुमती देते तेव्हाच रक्तातील अँटीबॉडीजचा संच पूर्ण झाला असेल, म्हणजेच, जर प्रथिने gp160, gp120, gp41 एकाच वेळी उपस्थित असतील, तर हे आहे. 100% एचआयव्ही संसर्ग. परंतु किमान एक गहाळ असल्यास, उदाहरणार्थ: gp41 अनुपस्थित आहे, परंतु तेथे फक्त gp160, gp120 आहेत, तर चाचणी संशयास्पद मानली जाते आणि पुनरावृत्ती आवश्यक आहे.

FAQ

इम्युनोब्लॉटचे टप्पे काय आहेत?

1. पट्टी तयार करणे.इम्युनोडेफिशियन्सी व्हायरस (एचआयव्ही), ज्याचे पूर्वी शुद्धीकरण केले गेले आहे आणि त्याचे घटक घटक नष्ट केले गेले आहेत, ते इलेक्ट्रोफोरेसीसच्या अधीन आहेत, तर एचआयव्ही बनवणारे प्रतिजन आण्विक वजनाने वेगळे केले जातात. नंतर, ब्लॉटिंग करून (“ब्लॉटर” वर जादा शाई पिळून काढण्यासारखे) प्रतिजन नायट्रोसेल्युलोजच्या पट्टीमध्ये हस्तांतरित केले जातात, ज्यामध्ये आता डोळ्यांना न दिसणार्‍या एचआयव्हीच्या वैशिष्ट्यपूर्ण प्रतिजैविक बँडचा स्पेक्ट्रम आहे.
2. नमुना अभ्यास.चाचणी सामग्री (सीरम, रुग्णाचा रक्त प्लाझ्मा इ.) नायट्रोसेल्युलोज पट्टीवर लागू केली जाते आणि जर नमुन्यात विशिष्ट प्रतिपिंडे असतील तर ते काटेकोरपणे संबंधित (पूरक) प्रतिजैविक बँडशी बांधले जातात. त्यानंतरच्या हाताळणीच्या परिणामी, या परस्परसंवादाचा परिणाम व्हिज्युअलाइज्ड - दृश्यमान केला जातो.
3. परिणामाचा अर्थ लावणे.नायट्रोसेल्युलोज प्लेटच्या काही भागात बँडची उपस्थिती कठोरपणे परिभाषित एचआयव्ही प्रतिजनांच्या प्रतिपिंडांच्या अभ्यासलेल्या सीरममध्ये उपस्थितीची पुष्टी करते.

• लेन ए - सकारात्मक नियंत्रण
• लेन बी - कमकुवत सकारात्मक नियंत्रण
• लेन सी - नकारात्मक नियंत्रण
• स्ट्राइप डी - सकारात्मक नमुना (एचआयव्ही -1 साठी प्रतिपिंडे आढळले)

विश्लेषणाचा उलगडा कसा करायचा?

जर एलिसाने या चाचणी प्रणालीनुसार प्रतिजनांना सर्व किंवा जवळजवळ सर्व प्रतिपिंडांची उपस्थिती दर्शविली, तर हे सकारात्मक एचआयव्ही चाचणी दर्शवते. दुसऱ्या सेरोलॉजिकल एंझाइम इम्युनोसेनंतरचा प्रतिसाद सकारात्मक असल्यास, इम्युनोब्लॉट केले पाहिजे. त्याच्या निकालांचा अर्थ अधिक योग्य असेल. जर एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉर्बेंट परखने सकारात्मक परिणाम दिला, तर पुढील इम्युनोब्लॉट विश्लेषणाने एचआयव्हीची उपस्थिती देखील दर्शविली, तर अंतिम परिणाम दिला जाईल.

जेव्हा विश्लेषणे उलगडली जातात, तेव्हा तुम्हाला हे माहित असणे आवश्यक आहे की सकारात्मक एचआयव्ही चाचणी याद्वारे निर्धारित केली जाते:

• संसर्गानंतर 60% ते 65% 28 दिवस;
• 80% मध्ये - 42 दिवसांनी;
• 90% मध्ये - 56 दिवसांनी;
• 95% मध्ये - 84 दिवसांनी.

एचआयव्हीला प्रतिसाद सकारात्मक असल्यास, याचा अर्थ असा होईल की विषाणूचे प्रतिपिंडे आढळले आहेत. चुकीचे सकारात्मक उत्तर टाळण्यासाठी, शक्यतो दोनदा पुन्हा चाचणी करणे आवश्यक आहे. दोनपैकी दोन चाचण्या उत्तीर्ण करताना किंवा त्यापैकी 2 चाचण्यांमध्ये 3 चाचण्या उत्तीर्ण करताना इम्युनोडेफिशियन्सी प्रतिपिंडे आढळल्यास, परिणाम सकारात्मक असल्याचे मानले जाते.

पी24 प्रतिजन संसर्गाच्या तारखेपासून 14 दिवसांपूर्वी रक्तामध्ये शोधले जाऊ शकते. एन्झाईम इम्युनोसे पद्धतीचा वापर करून, हे प्रतिजन 14 ते 56 दिवसांपर्यंत शोधले जाते. 60 दिवसांनंतर, ते यापुढे रक्तात नाही. जेव्हा एड्स शरीरात तयार होतो तेव्हाच रक्तातील या p24 प्रोटीनची पुन्हा वाढ होते. म्हणून, संसर्गाच्या पहिल्या दिवसात एचआयव्ही शोधण्यासाठी किंवा रोग कसा वाढतो हे निर्धारित करण्यासाठी आणि उपचार प्रक्रियेचे निरीक्षण करण्यासाठी एन्झाइम इम्युनोसे चाचणी प्रणाली वापरली जाते. एन्झाइम इम्युनोसेची उच्च विश्लेषणात्मक संवेदनशीलता पहिल्या उपप्रकारातील एचआयव्हीसाठी जैविक सामग्रीमध्ये p24 प्रतिजन 5 ते 10 pg/ml च्या एकाग्रतेवर शोधते, दुसऱ्या उपप्रकारातील HIV साठी 0.5 ng/ml किंवा त्याहून कमी.

अंतर्गत संशयास्पदएंजाइम इम्युनोसेच्या परिणामाचा अर्थ असा होतो की निदान कुठेतरी चुकले होते, नियमानुसार, वैद्यकीय कर्मचार्‍यांनी काहीतरी मिसळले किंवा व्यक्तीला संसर्गाची चिन्हे आहेत आणि परिणाम नकारात्मक आहे, ज्यामुळे संशय येतो, त्या व्यक्तीला पुन्हा चाचणीसाठी पाठवले जाते. .

अंतर्गत खोटे सकारात्मकरुग्णाच्या खालील अटींमध्ये रक्त चाचण्या घेतल्या गेल्यावर परिणाम हा परिणाम समजला जातो:

• गर्भधारणा;
• जर एखाद्या व्यक्तीमध्ये हार्मोनल असंतुलन असेल;
• दीर्घकाळापर्यंत इम्युनोसप्रेशनसह.

या प्रकरणात विश्लेषणाचा उलगडा कसा करायचा? कमीत कमी एक प्रोटीन आढळल्यास चुकीचा सकारात्मक परिणाम दिला जातो. p24 प्रतिजन वैयक्तिक भिन्नतेवर अवलंबून आहे या वस्तुस्थितीमुळे, या पद्धतीचा वापर करून, संसर्गाच्या पहिल्या कालावधीत 20% ते 30% रुग्ण आढळतात.

सकारात्मक चाचणी निकाल किती विश्वसनीय आहे?

कधीकधी एलिसाचे चुकीचे सकारात्मक परिणाम असतात (सुमारे 1% प्रकरणांमध्ये), या परिणामाचे कारण गर्भधारणा, विविध व्हायरल इन्फेक्शन्स तसेच एक साधा अपघात असू शकतो. सकारात्मक परिणाम प्राप्त झाल्यानंतर, अधिक अचूक चाचणी आवश्यक आहे - एक इम्युनोब्लॉट, ज्याच्या परिणामांनुसार निदान केले जाते. सकारात्मक ELISA नंतर सकारात्मक इम्युनोब्लॉट परिणाम 99.9% विश्वसनीय आहे - कोणत्याही वैद्यकीय चाचणीसाठी ही कमाल अचूकता आहे. जर इम्युनोब्लॉट नकारात्मक असेल तर पहिली चाचणी खोटी पॉझिटिव्ह होती आणि खरं तर त्या व्यक्तीला एचआयव्ही नाही.

अनिश्चित (संशयास्पद) परिणाम म्हणजे काय?

जर एलिसा सकारात्मक किंवा नकारात्मक असेल तर इम्युनोब्लॉट सकारात्मक, नकारात्मक किंवा अनिश्चित असू शकतात. अनिश्चित इम्युनोब्लॉट परिणाम, म्हणजे. जर संसर्ग नुकताच झाला असेल आणि रक्तात एचआयव्हीसाठी काही प्रतिपिंडे असतील तर व्हायरसच्या किमान एक प्रोटीनची इम्युनोब्लॉटमध्ये उपस्थिती पाहिली जाऊ शकते, अशा परिस्थितीत काही काळानंतर इम्युनोब्लॉट सकारात्मक होईल. तसेच, हिपॅटायटीस, काही जुनाट चयापचय रोग किंवा गर्भधारणेदरम्यान एचआयव्ही संसर्गाच्या अनुपस्थितीत अनिश्चित परिणाम दिसू शकतो. या प्रकरणात, एकतर इम्युनोब्लॉट नकारात्मक होईल किंवा अनिश्चित परिणामाचे कारण सापडेल.

विश्लेषणाची किंमत किती आहे?

HIV साठी इम्युनोब्लॉट स्वस्त संशोधनासाठी लागू होत नाही. सरासरी, एंजाइम इम्युनोसेद्वारे तपासणी तपासणीची किंमत 500 ते 900 रूबल आहे. इम्युनोब्लोटिंग हा एक पडताळणी अभ्यास आहे, ज्याची किंमत तीन ते पाच हजार रूबल आहे. अधिक जटिल पद्धती अधिक महाग आहेत. उदाहरणार्थ, पॉलिमरेझ चेन रिएक्शन (पीसीआर) च्या विश्लेषणासाठी, आपल्याला सुमारे 12,000 रूबल भरावे लागतील.

विश्लेषण कुठे करायचे?

मी एचआयव्हीची चाचणी कोठे करू शकतो? एलिसा, इम्युनोब्लॉट अभ्यास शहरी खाजगी दवाखान्यांमध्ये केले जातात, परिणाम एका दिवसात जारी केले जातात. तत्काळ निदान देखील शक्य आहे. राज्य वैद्यकीय संस्थांमध्ये, रशियन फेडरेशनच्या कायद्यानुसार एलिसा चाचण्या आणि इम्युनोब्लॉटिंग विनामूल्य केले जातात. गरोदर स्त्रिया, तसेच रूग्ण ज्या रूग्णालयात दाखल होणार आहेत किंवा शस्त्रक्रिया करायच्या आहेत, त्यांना संसर्गजन्य रोगांसाठी चाचणी करणे आवश्यक आहे.

हायपोटेन्शन, टाकीकार्डिया, श्वास लागणे, सायनोसिस. रोगाच्या गंभीर प्रकरणांमध्ये, रक्तस्त्राव, रक्ताच्या मिश्रणाने उलट्या होणे शक्य आहे. यकृत आणि प्लीहा वाढतात. ओलिगुरिया लक्षात घ्या. तापमान 3-10 दिवस सतत उच्च राहते. परिधीय रक्तामध्ये - सूत्राच्या डावीकडे शिफ्टसह न्यूट्रोफिलिक ल्यूकोसाइटोसिस. प्लेगच्या वर्णन केलेल्या सामान्य अभिव्यक्तींव्यतिरिक्त, रोगाच्या वैयक्तिक क्लिनिकल स्वरूपाचे वैशिष्ट्यपूर्ण जखम विकसित होतात.

त्वचेचा फॉर्म दुर्मिळ आहे (3-5%). संक्रमणाच्या प्रवेशद्वाराच्या जागी एक स्पॉट दिसून येतो, नंतर एक पॅप्युल, एक पुटिका (संघर्ष), सेरस हेमोरेजिक सामग्रीने भरलेला, हायपरिमिया आणि एडेमा असलेल्या घुसखोर झोनने वेढलेला असतो. Flikten तीव्र वेदना द्वारे दर्शविले जाते. जेव्हा उघडले जाते तेव्हा ते तळाशी गडद खरुज असलेले व्रण बनवते. प्लेग अल्सर दीर्घकाळ द्वारे दर्शविले जाते, हळूहळू बरे होते, एक डाग बनते. जर हा फॉर्म सेप्टिसीमियामुळे गुंतागुंतीचा असेल तर दुय्यम पस्टुल्स आणि अल्सर होतात. कदाचित प्रादेशिक बुबोचा विकास (त्वचा-बुबोनिक फॉर्म).

बुबोनिक फॉर्म बहुतेकदा आढळतो (सुमारे 80%) आणि तुलनेने सौम्य कोर्सद्वारे दर्शविले जाते. रोगाच्या पहिल्या दिवसांपासून, प्रादेशिक लिम्फ नोड्सच्या प्रदेशात एक तीक्ष्ण वेदना दिसून येते, ज्यामुळे त्याला हालचाल करणे कठीण होते आणि रुग्णाला सक्तीची स्थिती घेण्यास प्रवृत्त करते. प्राथमिक बुबो, एक नियम म्हणून, एकटे असतात; एकाधिक बुबो कमी सामान्यपणे पाहिले जातात. बहुतेक प्रकरणांमध्ये, इनग्विनल आणि फेमोरल लिम्फ नोड्स प्रभावित होतात, ऍक्सिलरी आणि सर्व्हायकल लिम्फ नोड्स काहीसे कमी सामान्य असतात. बुबोचे आकार अक्रोड ते मध्यम आकाराच्या सफरचंदापर्यंत बदलतात. तेजस्वी वैशिष्ट्ये म्हणजे तीक्ष्ण वेदना, दाट सुसंगतता, अंतर्निहित ऊतींना चिकटणे, पेरीएडेनाइटिसच्या विकासामुळे आकृतिबंधांची गुळगुळीतपणा. आजाराच्या दुसऱ्या दिवशी बुबो तयार होण्यास सुरुवात होते. जसजसे ते विकसित होते, त्यावरील त्वचा लाल, चमकदार, अनेकदा सायनोटिक होते. सुरुवातीला ते दाट असते, नंतर ते मऊ होते, चढ-उतार दिसून येते, आकृतिबंध अस्पष्ट होतात. आजारपणाच्या 10-12 व्या दिवशी, ते उघडते - एक फिस्टुला, अल्सरेशन तयार होते. रोगाचा सौम्य कोर्स आणि आधुनिक अँटीबायोटिक थेरपीसह, त्याचे रिसॉर्प्शन किंवा स्क्लेरोसिस दिसून येते. रोगजनकांच्या हेमेटोजेनस परिचयाच्या परिणामी, दुय्यम बुबो तयार होऊ शकतात, जे नंतर दिसतात आणि आकाराने लहान असतात, कमी वेदनादायक असतात आणि नियमानुसार, पोट भरत नाहीत. या स्वरूपाची एक भयानक गुंतागुंत म्हणजे दुय्यम फुफ्फुस किंवा दुय्यम सेप्टिक फॉर्मचा विकास असू शकतो, ज्यामुळे रुग्णाची स्थिती तीव्रपणे बिघडते, मृत्यूपर्यंत.

प्राथमिक फुफ्फुस 5-10% प्रकरणांमध्ये साथीच्या काळात हा फॉर्म दुर्मिळ आहे आणि हा रोगाचा सर्वात महामारीशास्त्रीयदृष्ट्या धोकादायक आणि गंभीर क्लिनिकल प्रकार आहे. ते तीव्रपणे, हिंसकपणे सुरू होते. स्पष्ट नशा सिंड्रोमच्या पार्श्वभूमीवर, कोरडा खोकला, तीव्र श्वास लागणे, छातीत दुखणे पहिल्या दिवसांपासून दिसून येते. खोकला नंतर उत्पादक बनतो, थुंकीची निर्मिती करतो जी काही थुंकांपासून मोठ्या प्रमाणात भिन्न असू शकते, क्वचितच अनुपस्थित असते. थुंकी, प्रथम फेसाळ, काचयुक्त, पारदर्शक, नंतर रक्तरंजित स्वरूप प्राप्त करते, नंतर पूर्णपणे रक्तरंजित होते, त्यात मोठ्या प्रमाणात प्लेग बॅक्टेरिया असतात. सहसा ते द्रव सुसंगतता असते - निदान चिन्हांपैकी एक. भौतिक डेटा दुर्मिळ आहे: प्रभावित लोबवरील पर्क्यूशन आवाजाचा थोडासा लहान होणे, ऑस्कल्टेशन दरम्यान, विपुल प्रमाणात बारीक बबलिंग रेल्स, जे स्पष्टपणे रुग्णाच्या सामान्य गंभीर स्थितीशी संबंधित नाहीत. श्वासोच्छवासाचा त्रास, सायनोसिस, मूर्खपणाचा विकास, पल्मोनरी एडेमा आणि टीएसएस वाढणे या टर्मिनल कालावधीचे वैशिष्ट्य आहे. रक्तदाब कमी होतो, नाडी वेगवान होऊन धाग्यासारखी बनते, हृदयाचे आवाज मफल होतात, हायपरथर्मियाची जागा हायपोथर्मियाने घेतली आहे. उपचारांच्या अनुपस्थितीत, रोग 2-6 दिवसात घातक आहे. प्रतिजैविकांच्या लवकर वापरासह, रोगाचा कोर्स सौम्य आहे, थोडासा फरक आहे

एमपीबीए-ब्लॉट-एचआयव्ही-1, एचआयव्ही-2 अभिकर्मक किट एचआयव्ही-1 आणि/किंवा एचआयव्ही-1 गट O आणि/किंवा एचआयव्ही-2 च्या वैयक्तिक प्रथिनांना (प्रतिजन) प्रतिपिंडांच्या शोधाची पुष्टी करण्यासाठी डिझाइन केलेले आहे. रोगप्रतिकारक डाग पद्धतीद्वारे प्लाझ्मा.

वैशिष्ट्यपूर्ण प्रारूप:

• अभिकर्मकांच्या संचामध्ये "एमपीबीए - ब्लॉट - एचआयव्ही -1, एचआयव्ही -2" एचआयव्ही 1 चे शुद्धीकृत लायसेट व्हायरल प्रोटीन आणि एचआयव्ही -2 चे पेप्टाइड - प्रतिजैनिक निर्धारीत gp36 समाविष्ट आहे;
• एका पट्टीवर एचआयव्ही-1, एचआयव्ही-1 गट ओ, एचआयव्ही 2 ची ऍन्टीबॉडीज शोधणे प्रदान करते;
• विश्लेषणे तयार करण्यासाठी आणि आयोजित करण्यासाठी एक सोपी प्रक्रिया;
• प्रतिक्रियेचे अंतर्गत गुणवत्ता नियंत्रण*
• विश्लेषणाची कमाल गती (3 तास);
• चाचणी नमुना एक लहान खंड - 20 μl;
• संशोधनासाठी अतिरिक्त उपकरणे आवश्यक नाहीत;
• किटच्या गुणवत्तेची हमी रशियन आणि आंतरराष्ट्रीय मानक नमुने वापरून दिली जाते**

* अंतर्गत गुणवत्ता नियंत्रण याची खात्री करून घेतली जाते:

• अंतर्गत नियंत्रण पट्ट्या, सीरम किंवा प्लाझ्मा नमुना परिचय नियंत्रण प्रदान करते;
• नियंत्रण नकारात्मक सीरम (के-);
• पॉझिटिव्ह सीरम (के+) नियंत्रित करा, ज्यामुळे पट्टीवर आढळलेल्या बँड ओळखता येतात;
• कमकुवत पॉझिटिव्ह सीरम (के + सीएल) नियंत्रित करा, जे अभिकर्मक किटच्या संवेदनशीलतेवर नियंत्रण प्रदान करते.

**गुणवत्ता हमी:

एमपीबीए-ब्लॉट-एचआयव्ही-1, एचआयव्ही-2 अभिकर्मक किटची वैशिष्ट्ये दात्यांच्या यादृच्छिक नमुन्यातील नमुने, एचआयव्ही संसर्गाचे निदान झालेले रुग्ण, व्यावसायिक सेरोकन्व्हर्जन पॅनेल, मानक पॅनेल आणि "संभाव्यपणे हस्तक्षेप करणारे नमुने यांच्या चाचणीद्वारे निर्धारित केले गेले. निर्धार" घटक.

अभिकर्मकांचे किट मानक पॅनेलच्या सेराच्या अभ्यासात चुकीचे सकारात्मक परिणाम देत नाही ज्यात एचआयव्ही 1.2 आणि एचआयव्ही-1 प्रतिजन ("स्टँडर्ड एटी (-) एचआयव्ही", क्रमांक FSR 2007/00953 दिनांक 10.25 च्या प्रतिपिंडांचा समावेश नाही. .2007). विशिष्टता - 100%.

एचआयव्ही-1, एचआयव्ही-2 संसर्गाची प्राथमिक पुष्टी नसलेल्या विविध रक्त केंद्रे आणि क्लिनिकमधील 200 रक्तदात्यांच्या यादृच्छिक नमुन्याचे परीक्षण करून निदानाची विशिष्टता निश्चित केली गेली. देणगीदारांच्या यादृच्छिक नमुन्याच्या अभ्यासात विशिष्टता 100% होती;

अभिकर्मक किटची विशिष्टता 250 नमुन्यांच्या अभ्यासात निर्धारित केली गेली, ज्यात गर्भवती महिला, रुग्णालयात दाखल रुग्ण, हिपॅटायटीस सी आणि ई असलेले रुग्ण आणि "संभाव्यपणे हस्तक्षेप करणार्‍या निर्धार" घटकांसह प्राप्त केलेले सीरम किंवा प्लाझ्मा नमुने यांचा समावेश आहे. MPBA-Blot-HIV-1, HIV-2 किट वापरताना, या नमुन्यांसाठी कोणतेही खोटे-सकारात्मक परिणाम आढळले नाहीत.

निदानाची संवेदनशीलता हे वापरून निर्धारित केली गेली:
- Boston Biomedica, Inc HIV-1 पॅनेल (WWRB 301) मधील प्लाझ्मा नमुने HIV-1 चे वेगवेगळे उपप्रकार असलेल्या वेगवेगळ्या प्रदेशांमधून: गट M (उपप्रकार A, B, C, D, E, F), आणि गट O; अभिकर्मक किटची संवेदनशीलता 100% होती;

बॉस्टन बायोमेडिका, इंक (सेराकेअर लाइफ सायन्सेस), मांजरीच्या आंतरराष्ट्रीय सेरोकन्व्हर्जन पॅनेलच्या अभ्यासात अभिकर्मक किटची संवेदनशीलता निर्धारित केली गेली. nrs PRB 903, PRB 904, PRB 909, PRB 912, PRB 916, PRB 917, PRB 918, PRB 919, PRB 921, PRB 923, PRB 924, PRB 923, PRB 924, PRB 927, PRB 2928, PRB 2928

अभिकर्मकांचे किट एचआयव्ही-1 ("स्टँडर्ड एटी (+) एचआयव्ही-1", क्रमांक FSR 2007/00953 दिनांक 25 ऑक्टोबर 2007) च्या प्रतिपिंड असलेल्या मानक पॅनेलच्या सेरामध्ये HIV-1 चे ऍन्टीबॉडीज शोधते. एचआयव्ही-2 ("स्टँडर्ड एटी (+) एचआयव्ही-2", क्र. एफएसआर 2007/00953 ऑफ 10/25/2007) प्रतिपिंड असलेल्या मानक पॅनेलच्या सेरामध्ये एचआयव्ही-2. संवेदनशीलता - 100%.

नोंदणी प्रमाणपत्र क्रमांक FSR 2010/07958 दिनांक 13 जुलै 2011 (वैधता मर्यादित नाही)

संयुग:

• इम्युनोसॉर्बेंट. वैयक्तिक एचआयव्ही-1 प्रथिने (gp160, gp120, p66, p55, p51, gp41, p31, p24, p17) असलेल्या पांढर्‍या नायट्रोसेल्युलोज झिल्लीच्या पट्ट्या त्यावर इलेक्ट्रोट्रांसफरच्या पद्धतीने शोषल्या जातात आणि कृत्रिम HIV-2 पेप्टाइडसह पट्टीवर लावल्या जातात, जीपी 36 प्रोटीन आणि अँटी-आयजीजी मानवी (अंतर्गत नियंत्रण) चे एनालॉग - 18 पीसी;
• के- - नकारात्मक सीरम नियंत्रित करा. मानवी रक्त सीरम ज्यामध्ये HIV-1,2, HCV, HIV प्रतिजन, HBsAg चे ऍन्टीबॉडीज नसतात, 560C वर गरम करून निष्क्रिय केले जातात; पारदर्शक हलका पिवळा द्रव - 1 चाचणी ट्यूब (0.08 मिली). संरक्षक समाविष्टीत आहे: थिमेरोसल आणि सोडियम अझाइड;
• K+ - पॉझिटिव्ह सीरम नियंत्रित करा. एचआयव्ही-1,2 (टायटर 1:10000 पेक्षा कमी नाही), एचबीएसएजी, एचआयव्ही प्रतिजन, एचसीव्हीचे प्रतिपिंड नसलेले, 560 सी तापमानात गरम करून निष्क्रिय केलेले मानवी रक्त सीरम; पारदर्शक हलका पिवळा द्रव - 1 चाचणी ट्यूब (0.08 मि.ली.) यामध्ये संरक्षक असतात: थिमेरोसल आणि सोडियम अॅझाइड;
• K+sl - कमकुवत सकारात्मक सीरम नियंत्रित करा. एचआयव्ही-1,2 (टायटर 1:200 पेक्षा जास्त नाही), एचबीएसएजी, एचआयव्ही प्रतिजन, एचसीव्हीचे प्रतिपिंड नसलेले, 560 सी तापमानात गरम करून निष्क्रिय केलेले मानवी रक्त सीरम; पारदर्शक हलका पिवळा द्रव - 1 चाचणी ट्यूब (0.08 मिली). संरक्षक समाविष्टीत आहे: थिमेरोसल आणि सोडियम अझाइड;
• RROKk (x10) - नमुने आणि संयुग्म पातळ करण्यासाठी उपाय. एकाग्रता - पूर्व-उपचारित सामान्य शेळी सीरम असलेले ट्रिस बफर; अपारदर्शक राखाडी द्रव - 1 कुपी (10 मिली). संरक्षक समाविष्टीत आहे: thimerosal;
• PRk (x20) - धुण्याचे समाधान. एकाग्रता - Tween-20 असलेले ट्रिस बफर; स्पष्ट रंगहीन द्रव - 1 कुपी (70 मिली). संरक्षक समाविष्टीत आहे: thimerosal;
• संयुग. मानवी IgG चे प्रतिपिंडे, अल्कधर्मी फॉस्फेटसह संयुग्मित; स्पष्ट रंगहीन द्रव - 1 चाचणी ट्यूब (0.06 मिली);
• सब्सट्रेट (रंगाचे समाधान). 5-ब्रोमो-4-फ्लोरो-इंडोलिल-फॉस्फेट (बीसीआयपी) आणि नायट्रोसिन टेट्राझोलियम (एनबीटी) चे समाधान; पारदर्शक हलका पिवळा द्रव - 1 कुपी (50 मिली);
• रोगप्रतिकारक ब्लॉटिंगसाठी पावडर. स्किम्ड मिल्क पावडर - अनाकार पांढरा किंवा हलका पिवळा पावडर - 5 पॅक x 1 ग्रॅम;
• प्रतिक्रिया सेट करण्यासाठी झाकण असलेली टॅब्लेट - 2 तुकडे;
• प्लॅस्टिक चिमटा - 1 तुकडा.