რუსეთში, ამჟამად, აივ ინფექციის ლაბორატორიული დიაგნოზის სტანდარტული პროცედურაა აივ-ის ანტისხეულების გამოვლენაფერმენტული იმუნოანალიზის გამოყენებითრასაც მოჰყვება რეაქციაში მათი სპეციფიკის დადასტურება იმუნური blotting.

აივ-ის ანტისხეულები ინფიცირებულთა 90-95%-ში ჩნდება დაინფიცირებიდან 3 თვის განმავლობაში, 5-9%-ში - დაინფიცირების მომენტიდან 6 თვის შემდეგ, ხოლო 0,5-1%-ში - მოგვიანებით. ანტისხეულების გამოვლენის ყველაზე ადრეული დროა ინფექციის მომენტიდან 2 კვირა.

აივ-ის ანტისხეულების გამოვლენა მოიცავს 2 ეტაპს. პირველ ეტაპზეაივ ანტიგენების საწინააღმდეგო ანტისხეულების მთლიანი სპექტრი გამოვლენილია სხვადასხვა ტესტების გამოყენებით: ფერმენტის იმუნოანალიზი, აგლუტინაცია, კომბინირებული, სავარცხელი, მემბრანული ფილტრი ან მემბრანული დიფუზური. მეორე ეტაპზეიმუნობლოტირება გამოიყენება ვირუსის ცალკეული ცილების ანტისხეულების დასადგენად. სამუშაოში დასაშვებია მხოლოდ სატესტო სისტემების გამოყენება, რომლებსაც აქვთ რუსეთის ფედერაციის ჯანდაცვის სამინისტროს გამოყენების ნებართვა. დიაგნოსტიკური პროცედურები უნდა ჩატარდეს მხოლოდ შესაბამისი ტესტების გამოყენების დამტკიცებული ინსტრუქციის შესაბამისად.

სისხლის აღება მზადდება კუბიტალური ვენიდან სუფთა, მშრალ სინჯარაში 3-5 მლ ოდენობით. ტვინის სისხლის აღება შესაძლებელია ახალშობილებისგან. მიღებული მასალის (მთლიანი სისხლი) შენახვა არ არის რეკომენდებული 12 საათზე მეტი ხნის განმავლობაში ოთახის ტემპერატურაზე და 1 დღეზე მეტი ხნის განმავლობაში მაცივარში 4-8°C ტემპერატურაზე. მოახლოებულმა ჰემოლიზმა შესაძლოა გავლენა მოახდინოს ანალიზის შედეგებზე. შრატი გამოყოფილია ცენტრიფუგირებით ან საცდელი მილის კედლის გასწვრივ სისხლის მიკვლევით პასტერის პიპეტით ან მინის ღეროთი. გამოყოფილი შრატი გადადის სუფთა (სასურველია სტერილურ) სინჯარაში, ფლაკონში ან პლასტმასის კონტეინერში და ამ ფორმით მისი შენახვა შესაძლებელია 7 დღემდე 4-8°C ტემპერატურაზე. მუშაობისას უნდა დაიცვათ უსაფრთხოების წესები, რომლებიც მოცემულია 1990 წლის 5 ივლისის No42-28 / 38-90 „შიდსის სადიაგნოსტიკო ლაბორატორიებში ანტიეპიდემიური რეჟიმის შესახებ ინსტრუქციებში“.

აივ-ის ტოტალური ანტისხეულების განსაზღვრა.

პირველი დადებითი შედეგის მიღებისთანავე ანალიზი ტარდება კიდევ 2-ჯერ (იგივე შრატით და იგივე სატესტო სისტემით). თუ მინიმუმ ერთი დადებითი შედეგი იქნა მიღებული (ორი დადებითი შედეგი ELISA-ს სამი ტესტიდან), შრატი იგზავნება საცნობარო ლაბორატორიაში.

საცნობარო ლაბორატორიაში პირველადი დადებითი შრატები (ანუ, რომელმაც ორი დადებითი შედეგი მისცა პირველ ტესტის სისტემაში) ხელახლა განიხილება ELISA-ში მეორე (სხვა) ტესტის სისტემაში, რომელიც შერჩეულია დასადასტურებლად.

მეორე ტესტის სისტემაში ანალიზის დადებითი შედეგის მიღებისას შრატი უნდა შემოწმდეს IS-ში.

თუ მეორე ტესტის სისტემაში უარყოფითი შედეგი მიიღება, შრატი ხელახლა განიხილება მესამე ტესტის სისტემაში.

თუ ტესტის უარყოფითი შედეგი მიიღება როგორც მეორე, ასევე მესამე ტესტის სისტემაში, დასკვნა გამოიცემა აივ ანტისხეულების არარსებობის შესახებ.

როდესაც დადებითი შედეგი მიიღება მესამე ტესტის სისტემაში, შრატი ასევე იგზავნება ანალიზისთვის იმუნური ბლოტის დროს.

იმუნური blotting.

მეთოდის პრინციპია ნიტროცელულოზის მემბრანაზე იმობილიზებული ვირუსის გარკვეული ცილების მიმართ ანტისხეულების აღმოჩენა. აივ-1-ის კონვერტის პროტეინებს (env) ჩვეულებრივ მოიხსენიებენ როგორც გლიკოპროტეინებს ("gp" ან "gp"), მოლეკულური წონით გამოხატული კილოდალტონებში (cd): 160 kd, 120 kd, 41 kd. აივ-2-ში გლიკოპროტეინებს აქვთ წონა 140 კდ, 105 კდ, 36 კდ. ძირითადი პროტეინები (gag) (საყოველთაოდ მოხსენიებული, როგორც პროტეინები - "p" ან "r") აივ-1-ში აქვთ მოლეკულური წონა 55 კდ, 24 კდ, 17 კდ, შესაბამისად და აივ-2 -56 კდ, 26 კდ. , 18 კდ. ფერმენტებს HIV-1 (pol) აქვთ მოლეკულური წონა 66 kd, 51 kd, 31 kd, HIV-2-68 kd.

იმუნობლოტირების შედეგები ინტერპრეტირებულია, როგორც დადებითი, განუსაზღვრელი და უარყოფითი.

დადებითი(დადებითი) განიხილება ნიმუშები, რომლებშიც აღმოჩენილია ანტისხეულები აივ 2 ან 3 გლიკოპროტეინის მიმართ.

უარყოფითი(უარყოფითი) არის შრატები, რომლებიც არ ავლენენ ანტისხეულებს აივ-ის რომელიმე ანტიგენის (ცილის) მიმართ.

განიხილება ნიმუშები, რომლებიც აღმოაჩენენ ანტისხეულებს აივ ერთი გლიკოპროტეინის და/ან აივ-ის რომელიმე პროტეინის მიმართ საეჭვო(გაურკვეველი ან ინტერპრეტირებული).

როდესაც გაურკვეველი შედეგი მიიღება ბირთვული ცილების (გაგი) ანტისხეულებით აივ-1 ანტიგენებით იმუნურ ბლოტში, ტარდება ტესტი აივ-2 ანტიგენებით.

იმუნური ბლოტის დადებითი შედეგების მიღების შემდეგ, კეთდება დასკვნა ტესტის მასალაში აივ-ის ანტისხეულების არსებობის შესახებ.

ტესტის უარყოფითი შედეგის მიღების შემდეგ, IB გამოსცემს დასკვნას, რომ არ არსებობს აივ-ის ანტისხეულები.

გაურკვეველი შედეგის მიღების შემდეგ (თუ p24 ანტიგენი არ იქნა გამოვლენილი), აივ-ის ანტისხეულების განმეორებითი ტესტები ტარდება 3 თვის შემდეგ.

და გაურკვეველი შედეგების შენარჩუნებისას კიდევ 3 თვის შემდეგ. თუ P24 ანტიგენი გამოვლინდა, მეორე გამოკვლევა ტარდება პირველი გაურკვეველი შედეგის მიღებიდან 2 კვირის შემდეგ.

თუ პირველი გამოკვლევიდან 6 თვის შემდეგ კვლავ მიიღება გაურკვეველი შედეგები და პაციენტს არ აქვს ინფექციის რისკფაქტორები და აივ ინფექციის კლინიკური სიმპტომები, შედეგი განიხილება როგორც ცრუ დადებითი. (ეპიდემიოლოგიური და კლინიკური ჩვენებების არსებობის შემთხვევაში, სეროლოგიური კვლევები მეორდება დადგენილი წესით).

იმუნური ბლოტი რეკომბინანტული ვირუსის სპეციფიკური პოლიპეპტიდების გამოყენებით "აივ ბლოტი" გამოირჩევა იმით, რომ იგი იყენებს არა თავად ვირუსულ ცილებს, არამედ რეკომბინანტულ პოლიპეპტიდებს - აივ ანტიგენების ანალოგებს ("Env1", "Gag1", "Poll", "Env2". "). რეკომბინანტული Env1 პოლიპეპტიდი აღმოაჩენს ანტისხეულებს პირდაპირ HIV-1 gp120 და gp41, Gag1 პოლიპეპტიდი p17 და p24 ანტიგენების, Po11 პოლიპეპტიდი p51 ანტიგენის, Env2 პოლიპეპტიდი HIV-2 gp110 და gp38 ანტიგენების მიმართ. შრატი დადებითად ითვლება, თუ ის რეაგირებს Env1 ან Env2 ან ორივე Env-თან (აივ 1 და 2 ტიპის ორმაგი ინფექცია). რეაქცია მხოლოდ Poll-ით და Gag-ით განიხილება, როგორც განუსაზღვრელი შედეგი, ამ შემთხვევაში შემდგომი დაკვირვება ტარდება ისევე, როგორც კლასიკური იმუნობლოტის გაურკვეველი შედეგების შემთხვევები აივ-ლიზატის გამოყენებით.

აივ ინფიცირებული დედისგან დაბადებულ ბავშვებში აივ ინფექციის სეროლოგიური დიაგნოზის თავისებურება ის არის, რომ როგორც ინფიცირებულ, ასევე არაინფიცირებულ ბავშვებს სიცოცხლის პირველი 6-12 თვის განმავლობაში აქვთ დედობრივი წარმოშობის აივ-ის ანტისხეულები, რომლებიც შემდეგ შეიძლება გაქრეს. კრიტერიუმი, რომელიც მიუთითებს ბავშვში აივ ინფექციის არსებობაზე, არის აივ-ის ანტისხეულების გამოვლენა 18 თვის ან მეტის ასაკში. აივ ინფიცირებული დედისგან დაბადებულ 18 თვის ბავშვში აივ-ის საწინააღმდეგო ანტისხეულების არარსებობა არის აივ ინფექციის საწინააღმდეგო კრიტერიუმი.

აღწერა

განსაზღვრის მეთოდიიმუნობლოტი.

შესასწავლი მასალაშრატი

შესაძლებელია სახლში ვიზიტი

ანტიბირთვული ანტისხეულები არის აუტოანტისხეულების ოჯახი, რომლებიც უკავშირდებიან რიბონუკლეინის მჟავებს და მათთან დაკავშირებულ ცილებს. ისინი გვხვდება შემაერთებელი ქსოვილის დიფუზური დაავადებების მქონე პაციენტების 90%-ზე მეტში და ასევე ხშირად შეინიშნება ღვიძლის აუტოიმუნურ დაავადებებში და რიგი სხვა პირობების დროს. დღეისათვის დახასიათებულია აუტოანტისხეულების ამ ოჯახის 200-მდე სახეობა, მაგრამ ყველა მათგანი არ შეიძლება გამოყენებულ იქნას კლინიკურ პრაქტიკაში.

ანტიბირთვული ანტისხეულების იმუნობლოტი საშუალებას იძლევა ერთდროულად ჩატარდეს ანტიბირთვული ანტისხეულების 15 ძირითადი ტიპი ერთ ტესტში, რაც უზრუნველყოფს ძირითადი სისტემური რევმატული დაავადებების დიფერენციალურ დიაგნოზს. იმუნობლოტით გამოვლენილი აუტოანტისხეულების თითოეული ტიპი ჩვეულებრივ შეინიშნება დამახასიათებელი კლინიკური სურათის მქონე პაციენტებში, ამიტომ აუტოანტისხეულების სპექტრი საშუალებას იძლევა არა მხოლოდ დაავადების დიაგნოსტიკა, არამედ გარკვეული კლინიკური გამოვლინების განვითარების რისკის დადგენა.

ანტიბირთვული ანტისხეულების იმუნობლოტი მიზანშეწონილია გამოიყენოთ სეროლოგიური გამოკვლევის მეორე ეტაპზე სხვა ტესტების დადებითი შედეგით, რაც მიუთითებს სუბიექტის შრატში ანტიბირთვული ანტისხეულების არსებობაზე. ეს ტესტები მოიცავს ანტიბირთვული ანტისხეულების განსაზღვრას (ELISA სკრინინგი), ანტიბირთვული ფაქტორის (ANF) გამოვლენას Hep2 უჯრედებზე (), ანტიბირთვულ ანტისხეულებს და ანტისხეულებს ამოღებადი ბირთვული ანტიგენის მიმართ (ENA,).

ანტიბირთვული ანტისხეულების იმუნობლოტის მეთოდი სისტემური რევმატული დაავადებების დიაგნოსტიკაში ხასიათდება მაღალი კლინიკური სპეციფიკით. მაგრამ ანტიბირთვული ანტისხეულების სპეციფიკა, თვით ANF-ის მაღალი ტიტრების დროსაც კი, ყოველთვის არ არის შესაძლებელი, რადგან ანტიბირთვული ანტისხეულების რიგი ანტიგენები კვლავ დაუხასიათებელია. უარყოფითი იმუნობლოტის შედეგი ამ შემთხვევაში არ გამორიცხავს სისტემური რევმატული დაავადებების დიაგნოზს. რიგი ანტიბირთვული ანტისხეულების აღმოჩენა შესაძლებელია იმუნობლოტის გამოყენებით - მიოზიტის სპეციფიკური აუტოანტისხეულების პანელი () და იმუნობლოტი - აუტოანტისხეულების პანელი სკლეროდერმიაში ().

ლიტერატურა

1. ლაპინი ს.ვ. ტოტოლიანი ა.ა. აუტოიმუნური დაავადებების იმუნოლოგიური ლაბორატორიული დიაგნოსტიკა / გამომცემლობა "ჩელოვეკი", სანკტ-პეტერბურგი - 2010 წ. 272 ​​გვ.
2. ნასონოვი ე.ლ., ალექსანდროვა ე.ნ. რევმატული დაავადებების ლაბორატორიული დიაგნოსტიკის თანამედროვე სტანდარტები. კლინიკური გაიდლაინები / BHM, M - 2006 წ.
3. Conrad K, Schlosler W., Hiepe F., Fitzler M.J. აუტოანტისხეულები ორგანოს სპეციფიკურ აუტოიმუნურ დაავადებებში: დიაგნოსტიკური მითითება/ PABST, Dresden - 2011. 300 გვ.
4. Conrad K, Schlosler W., Hiepe F., Fitzler M.J. Autoantibodies in Systemic Autoimmune Diseases: A Diagnostic Reference/ PABST, Dresden - 2007. 300 გვ.
5. Gershvin ME, Meroni PL, Shoenfeld Y. Autoantibodies 2nd ed./ Elsevier Science - 2006. 862 გვ.
6. Shoenfeld Y., Cervera R, Gershvin ME დიაგნოსტიკური კრიტერიუმები აუტოიმუნურ დაავადებებში / Humana Press - 2008. 598 გვ.
7. რეაგენტების ნაკრების ინსტრუქციები.

ტრენინგი

სასურველია გაუძლოს ბოლო ჭამიდან 4 საათის შემდეგ, არ არსებობს სავალდებულო მოთხოვნები.

მითითებები დანიშვნის შესახებ

ტესტი მითითებულია შემდეგი პირობების დიაგნოსტიკისა და დიფერენციალური დიაგნოზისთვის:

• სისტემური წითელი მგლურა;
• კანქვეშა წითელი მგლურა და სხვა სახის კანის წითელი მგლურა;
• შემაერთებელი ქსოვილის შერეული დაავადება;
• სიოგრენის სინდრომი და მასთან დაკავშირებული დაავადებები;
• დიფუზური და ლოკალიზებული სკლეროდერმია, CREST სინდრომი;
• ანთებითი მიოპათიები (პოლიმიოზიტი და დერმატომიოზიტი);
• არასრულწლოვანთა ქრონიკული ართრიტი;
• აუტოიმუნური ჰეპატიტი;
• პირველადი ბილიარული ციროზი და სკლეროზული ქოლანგიტი;
• ამ ტესტის გამოყენება მითითებულია ანტიბირთვული ფაქტორის მაღალი ტიტრის, ანტიბირთვული ანტისხეულების, ამოღებული ბირთვული ანტიგენის ანტისხეულების, დნმ-ის ანტისხეულების, ნუკლეოსომების ანტისხეულების და ანტიფოსფოლიპიდური ანტისხეულების გამოვლენისას.

შედეგების ინტერპრეტაცია

ტესტის შედეგების ინტერპრეტაცია შეიცავს ინფორმაციას დამსწრე ექიმისთვის და არ არის დიაგნოზი. ამ განყოფილებაში მოცემული ინფორმაცია არ უნდა იქნას გამოყენებული თვითდიაგნოსტიკისთვის ან თვითმკურნალობისთვის. ზუსტ დიაგნოზს სვამს ექიმი, როგორც ამ გამოკვლევის შედეგების, ისე სხვა წყაროებიდან საჭირო ინფორმაციის გამოყენებით: ანამნეზი, სხვა გამოკვლევების შედეგები და ა.შ.

საზომი ერთეულები: ხარისხობრივი ტესტი, შედეგი წარმოდგენილია „გამოვლენილი“ ან „არ მოიძებნა“ სახით.

როდესაც გამოვლენილია ზოლი, რომელიც ახასიათებს ნებისმიერი ტიპის ანტისხეულების არსებობას, ზოლის ფერის ინტენსივობა დამატებით აღიწერება პლიუსების ("ჯვრების") რაოდენობით თითოეული გამოვლენილი ტიპის ანტისხეულებისთვის. პოზიტიურობის ხარისხის ზრდა ირიბად ასახავს აუტოანტისხეულების შინაარსს და აფინურობას.

საცნობარო მნიშვნელობები: ანტისხეულები Sm, RNP/Sm, SS-A (60 kDa), SS-A (52 kDa), SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENP-B, dsDNA, ჰისტონი, ნუკლეოსომა , Rib P, AMA-M2, Jo-1 ვერ მოიძებნა.

აუტოანტისხეულების განსაზღვრის შედეგი წარმოდგენილია "ჯვრებში" თითოეული შესაბამისი ანტიგენისთვის. სეროპოზიტიურობის ხარისხის ზრდა ირიბად ასახავს აუტოანტისხეულების შინაარსს და აფინურობას. სეროპოზიტიურობის ქულის ვარიანტები ჩამოთვლილია ქვემოთ:

1. ანტისხეულები არ იქნა ნაპოვნი.
2. +/- - სასაზღვრო შედეგი;
3. + - სპეციფიური ანტიგენის მიმართ აუტოანტისხეულების დაბალი შემცველობა;
4. ++ არის აუტოანტისხეულების საშუალო შემცველობა კონკრეტული ანტიგენის მიმართ;
5. +++ - სპეციფიკური ანტიგენის მიმართ აუტოანტისხეულების მაღალი შემცველობა.

ძირითადი დაავადებები, რომლებიც დაკავშირებულია ანტიბირთვული ანტისხეულების გამოვლენასთან:

ანტიგენი	მნიშვნელობა
სმ (სმიტი)	სპეციფიკური მარკერი სისტემური წითელი მგლურისთვის (შედის რევმატოლოგიის ამერიკული კოლეჯის, ACR, SLE-ის მე-10 კრიტერიუმში)
SS-A (Ro52)	აღინიშნება სხვადასხვა აუტოიმუნური დაავადებების დროს, უფრო ხშირად სისტემური წითელი მგლურა და მისი კანის ფორმები, სისტემური რევმატული დაავადებები, რევმატოიდული ართრიტი, ღვიძლის აუტოიმუნური დაავადებები და ა.შ.
SS-A (Ro60)	სისტემური წითელი მგლურა, წითელი მგლურას კანის ფორმები, სისტემური წითელი მგლურას ფოტომგრძნობელობა, თანდაყოლილი წითელი მგლურა და ნაყოფის გულის დაავადების მაღალი რისკი. მთავარი სეროლოგიური მაჩვენებელი სიოგრენის სინდრომის დროს. ხშირად აღინიშნება SS-A (Ro52) ანტიგენის ანტისხეულებთან ერთად.
SS-B	სიოგრენის სინდრომი, სისტემური წითელი მგლურა.
PCNA	სისტემური წითელი მგლურა, ლუპუს ნეფრიტის რისკი.
რიბოზომები (Ribo P)	სისტემური წითელი მგლურა, ცენტრალური ნერვული სისტემის დაზიანების რისკი.
ნუკლეოსომები	სისტემური წითელი მგლურა, ლუპუსის გლომერულონეფრიტის მაღალი რისკი.
ორჯაჭვიანი დნმ	სისტემური მგლურას ერითემატოზის სპეციფიკური მარკერი (შედის SLE ACR-ის მე-10 კრიტერიუმში), ლუპუს ნეფრიტის მაღალი რისკი.
snRNP/Sm	შემაერთებელი ქსოვილის შერეული დაავადება, სისტემური წითელი მგლურა თირკმელების დაზიანების დაბალი რისკით, სკლეროდერმია.
ჰისტონები	სისტემური წითელი მგლურა, წამლებით გამოწვეული წითელი მგლურა, სკლეროდერმია.
Scl-70	სისტემური სკლეროზი კანისა და შინაგანი ორგანოების დიფუზური დაზიანებით.
PM-Scl	სკლეროდერმია პოლიმიოზიტით.
CENP-B	CREST სინდრომი სკლეროდაქტილიით, ტელანგიექტაზიებით, კანქვეშა კალციფიკაციებით, რეინოს სინდრომით, ეზოფაგიტით.
Jo-1	პოლიმიოზიტი ანტისინთეზური სინდრომის სახით.
AMA-M2	პირველადი ბილიარული ციროზი, სიოგრენის სინდრომი.

იმუნობლოტირება (იმუნობლოტი) არის უაღრესად სპეციფიკური და ძალიან მგრძნობიარე საცნობარო მეთოდი, რომელიც ადასტურებს დიაგნოზს პაციენტებისთვის დადებითი ან განუსაზღვრელი ტესტის შედეგებით მიღებული, მათ შორის. RPGA ან ELISA გამოყენებით .

პათოგენის ცალკეული ანტიგენების მიმართ ანტისხეულების გამოვლენის ეს მეთოდი ეფუძნება ELISA-ს ნიტროცელულოზის მემბრანებზე, რომელზედაც სპეციალური ცილები გამოიყენება ცალკეული ზოლების სახით, გამოყოფილი გელის ელექტროფორეზით. თუ არსებობს ანტისხეულები გარკვეული ანტიგენების წინააღმდეგ, მუქი ხაზი ჩნდება შესაბამის ზოლში. იმუნობლოტის უნიკალურობა მდგომარეობს მის მაღალ საინფორმაციო შემცველობაში და მიღებული შედეგების სანდოობაში.

კვლევის მასალაარის ადამიანის შრატი ან პლაზმა. ერთ ზოლზე კვლევისთვის საჭიროა 1,5-2 მლ სისხლი ან 15-25 μl შრატი.

ჯანმო-ს რეკომენდაციით, აივ ინფექციის დიაგნოსტიკაში გამოიყენება იმუნობლოტირება (ვესტერნ ბლოტი), როგორც დამატებითი საექსპერტო მეთოდი, რომელმაც უნდა დაადასტუროს ELISA-ს შედეგები. ეს მეთოდი ჩვეულებრივ გამოიყენება ELISA დადებითი შედეგის ორმაგად შესამოწმებლად, რადგან ის უფრო მგრძნობიარე და სპეციფიკურია, თუმცა უფრო რთული და ძვირი.

იმუნობლოტირება აერთიანებს ფერმენტის იმუნოანალიზს (ELISA) ვირუსის ცილების წინასწარ ელექტროფორეზულ გამოყოფასთან გელში და მათ გადატანას ნიტროცელულოზის მემბრანაში. იმუნობლოტის პროცედურა რამდენიმე ეტაპისგან შედგება. პირველი, წინასწარ გაწმენდილი და განადგურებული მის შემადგენელ კომპონენტებამდე, აივ-ი ექვემდებარება ელექტროფორეზს, ხოლო ყველა ანტიგენი, რომლებიც ქმნიან ვირუსს, გამოყოფილია მოლეკულური წონის მიხედვით. შემდეგ, ბლოტით, ანტიგენები გელიდან გადადის ნიტროცელულოზის ზოლში ან ნეილონის ფილტრში, რომელიც ახლა შეიცავს აივ-ისთვის დამახასიათებელ თვალისთვის უხილავ ცილების სპექტრს. შემდეგი, ტესტის მასალა (შრატი, პაციენტის სისხლის პლაზმა და ა.შ.) გამოიყენება ზოლზე და თუ ნიმუშში არის სპეციფიკური ანტისხეულები, ისინი უკავშირდებიან ანტიგენის ცილების ზოლებს, რომლებიც მკაცრად შეესაბამება მათ. შემდგომი მანიპულაციების შედეგად (როგორც ELISA), ამ ურთიერთქმედების შედეგი ვიზუალიზდება - ხილული ხდება. ზოლების არსებობა ზოლის გარკვეულ უბნებში ადასტურებს ანტისხეულების არსებობას შესწავლილ შრატში მკაცრად განსაზღვრული აივ ანტიგენების მიმართ.

იმუნობლოტირება ყველაზე ხშირად გამოიყენება აივ ინფექციის დიაგნოზის დასადასტურებლად. ჯანდაცვის მსოფლიო ორგანიზაცია შრატს დადებითად მიიჩნევს, თუ აივ-ის კონვერტის რომელიმე ორი ცილის მიმართ ანტისხეულები აღმოჩენილია იმუნობლოტირების გზით. ამ რეკომენდაციების მიხედვით, თუ არსებობს რეაქცია კონვერტის მხოლოდ ერთ პროტეინთან (gp160, gp120, gp41) კომბინაციაში ან სხვა ცილებთან რეაქციის გარეშე, შედეგი საეჭვოდ ითვლება და მეორე კვლევა რეკომენდირებულია სხვა ნაკრების გამოყენებით. სერიიდან ან სხვა კომპანიისგან. თუ ამის შემდეგ შედეგი საეჭვო რჩება, კვლევები გრძელდება ყოველ 3 თვეში ერთხელ.

თავისებურებები

იმუნობლოტის ანალიზი არის საიმედო მეთოდი, რომელიც საშუალებას გაძლევთ განსაზღვროთ ანტისხეულების არსებობა პირველი და მეორე ტიპის აივ ანტიგენების მიმართ. თუ ადამიანი ინფიცირებულია, ანტისხეულები ჩნდება ორ კვირაში, რაც შეიძლება გამოვლინდეს გაცილებით გვიან. აივ-ის თავისებურება ის არის, რომ ანტისხეულების რაოდენობა სწრაფად იზრდება და რჩება პაციენტის სისხლში. მათი არსებობის შემთხვევაშიც კი, დაავადება შეიძლება არ გამოვლინდეს ორი ან მეტი წლის განმავლობაში. ELISA მეთოდი ყოველთვის ზუსტად არ განსაზღვრავს დაავადების არსებობას, შესაბამისად, იმუნობლოტირებისა და PCR-ის გამოყენებით შედეგების დადასტურებაა საჭირო, თუ ფერმენტული იმუნოანალიზი დადებითია.

მითითებები დანიშვნის შესახებ

რა არის ეს „იმუნობლოტი“ უკვე გაირკვა, მაგრამ ვის ენიშნება ეს კვლევა? ადამიანის იმუნოდეფიციტის ვირუსის (აივ) ტესტების იმუნობლოტირების ჩატარების მიზეზი არის ELISA დადებითი შედეგი. აუცილებელია გაიაროს ფერმენტული იმუნოანალიზი იმ პაციენტებისთვის, რომლებსაც ჩაუტარდებათ ოპერაცია. გარდა ამისა, ანალიზი უნდა ჩაუტარდეს ორსულობას გეგმავს ქალებს, ისევე როგორც ყველა, ვინც სექსუალურად უხამსია. დანიშნეთ იმუნობლოტირება აივ-ით დაავადებულ პაციენტებზე, თუ ELISA-ს შედეგები საეჭვოა.

ექიმთან მისვლის მიზეზი შეიძლება იყოს შემდეგი საგანგაშო სიმპტომები:

• მკვეთრი წონის დაკარგვა;
• სისუსტე, შრომისუნარიანობის დაკარგვა;
• ნაწლავის დარღვევა (დიარეა), რომელიც გრძელდება სამი კვირის განმავლობაში;
• სხეულის დეჰიდრატაცია;
• ცხელება;
• გადიდებული ლიმფური კვანძები სხეულში;
• კანდიდოზის, ტუბერკულოზის, პნევმონიის, ტოქსოპლაზმოზის, ჰერპესის გამწვავების განვითარება.

პაციენტს არ სჭირდება მომზადება ვენური სისხლის ჩაბარებამდე. სწავლამდე 8-10 საათით ადრე არ შეიძლება ჭამა. არ არის რეკომენდირებული ალკოჰოლური და ყავის სასმელების დალევა, მძიმე ფიზიკური ვარჯიშები, მღელვარება სისხლის ჩაბარებამდე ერთი დღით ადრე.

როგორ ტარდება კვლევა?

პაციენტის თვალსაზრისით, იმუნობლოტი არაფრით განსხვავდება სხვა ანალიზისგან: იღებენ ვენურ სისხლს, იკვლევენ და მიიღება შედეგი. მაგრამ თუ ტექნიკის შესახებ ცოტა უფრო დეტალურად შედიხართ, მაშინ ეს არც ისე მარტივია, მაგრამ მაინც შეეცადეთ გაარკვიოთ.

პირველ რიგში, ადამიანის იმუნოდეფიციტის ვირუსის "საცნობარო" აღებულია რეაგენტის მწარმოებელ ქარხანაში. შემდეგ, სპეციალური პროცედურის (ელექტროფორეზის) გამოყენებით გელის გარემოში, ვირუსი ნადგურდება მის უმცირეს კომპონენტებამდე: პროტეინებამდე (ვირუსის ანტიგენები). შემდეგ, თავად ბლოტის გამოყენებით (ინგლისური wetting-დან) ნაწილაკები თავსდება სპეციალურ მასალაზე - ნიტროცელულოზაზე ან ნეილონის ფილტრზე, მიიღება გამოსაყენებლად მზა ინდიკატორი, ე.წ. ზოლი არის ზოლი, რომელშიც ანტიგენები ნაწილდება მათი მოლეკულური წონის მიხედვით, მკაფიო თანმიმდევრობით, ანუ გარკვეული ცილა შეესაბამება ქაღალდის თითოეულ მილიმეტრს.

მოგეხსენებათ, თუ ვირუსები არის ადამიანის სისხლში, მაშინ სხეული იწყებს ანტისხეულების გამომუშავებას მათი გარსების წინააღმდეგ (გარკვეული ცილები) და თითოეულ ვირუსს აქვს ანტიგენის ცილების საკუთარი ნაკრები. იმუნობლოტის მეთოდის საფუძველია სისხლში ანტიგენური ცილების ანტისხეულების აღმოჩენა. ყოველივე ამის შემდეგ, თუ ანტისხეული ეჯახება ანტიგენს, მაშინ ისინი აუცილებლად ურთიერთქმედებენ ერთმანეთთან - ისინი "წებვენ".

ასე რომ, ანტიგენები არის ზოლის ზოლზე და თუ ტესტის სუბიექტის სისხლში არის შესაფერისი ანტიგენები, ისინი აუცილებლად ურთიერთქმედებენ ერთმანეთთან და ამ ადგილას, ზოლის ზოლზე, გამოჩნდება ინდიკატორი - გამოჩნდება ბინა. (ორსულობის ტესტის მსგავსად). უფრო მეტიც, ზოლის კონკრეტულ ადგილას, ამ გზით ექიმი მიხვდება, არის თუ არა სისხლში კონკრეტული ვირუსისთვის დამახასიათებელი ცილების ნაკრები.

ასე, მაგალითად, თუ ცილის ლოკალიზაციის ადგილებში ზოლზე დაბნელებაა gp160, gp120, gp41აივ დიაგნოზირებულია, სხვა ვირუსებისთვის ეს იქნება ცილების სრულიად განსხვავებული ნაკრები.

უნდა აღინიშნოს, რომ იმუნობლოტი საშუალებას გაძლევთ ზუსტად განსაზღვროთ ვირუსის არსებობა მხოლოდ იმ შემთხვევაში, თუ სისხლში ანტისხეულების ნაკრები დასრულებულია, ანუ თუ ცილები gp160, gp120, gp41 ერთდროულად არის, მაშინ ეს არის 100% აივ ინფექცია. მაგრამ თუ ერთი მაინც აკლია, მაგალითად: gp41 არ არის, მაგრამ არის მხოლოდ gp160, gp120, მაშინ ტესტი ითვლება საეჭვოდ და მოითხოვს გამეორებას.

ხშირად დასმული კითხვები

რა ეტაპებია იმუნობლოტი?

1. ზოლის მომზადება.იმუნოდეფიციტის ვირუსი (აივ), რომელიც ადრე იყო გაწმენდილი და განადგურებული მის შემადგენელ კომპონენტებამდე, ექვემდებარება ელექტროფორეზს, ხოლო ანტიგენები, რომლებიც ქმნიან აივ-ს, გამოყოფილია მოლეკულური წონის მიხედვით. შემდეგ, ბლოტით (მსგავსი "ბლოტერზე" ზედმეტი მელნის გამოწურვისა), ანტიგენები გადაეცემა ნიტროცელულოზის ზოლს, რომელიც ახლა შეიცავს აივ-ისთვის დამახასიათებელ ანტიგენური ზოლების სპექტრს, რომელიც თვალისთვის უხილავია.
2. ნიმუშის შესწავლა.ტესტის მასალა (შრატი, პაციენტის სისხლის პლაზმა და ა.შ.) გამოიყენება ნიტროცელულოზის ზოლზე და თუ ნიმუშში არის სპეციფიური ანტისხეულები, ისინი უკავშირდებიან მკაცრად შესაბამის (კომპლიმენტურ) ანტიგენურ ზოლებს. შემდგომი მანიპულაციების შედეგად ამ ურთიერთქმედების შედეგი ვიზუალიზდება - ხილული ხდება.
3. შედეგის ინტერპრეტაცია.ნიტროცელულოზის ფირფიტის გარკვეულ უბნებში ზოლების არსებობა ადასტურებს ანტისხეულების შრატში ყოფნას მკაცრად განსაზღვრული აივ ანტიგენების მიმართ.

• ჩიხი A - პოზიტიური კონტროლი
• ბ ჩიხი - სუსტი დადებითი კონტროლი
• ჩიხი C - უარყოფითი კონტროლი
• ზოლი D - დადებითი ნიმუში (აიჩ-1-ის ანტისხეულები აღმოჩენილია)

როგორ გავშიფროთ ანალიზი?

თუ ELISA-მ აჩვენა ანტიგენების ყველა ან თითქმის ყველა ანტისხეულის არსებობა ამ ტესტის სისტემის მიხედვით, ეს მიუთითებს აივ-ზე დადებით ტესტზე. თუ პასუხი მეორე სეროლოგიური ფერმენტის იმუნოანალიზის შემდეგ დადებითია, მაშინ უნდა ჩატარდეს იმუნობლოტი. მისი შედეგების ინტერპრეტაცია უფრო სწორი იქნება. თუ ფერმენტთან დაკავშირებულმა იმუნოსორბენტულმა ანალიზმა დადებითი შედეგი გამოიღო, მომდევნო იმუნობლოტმა ანალიზმაც აჩვენა აივ-ის არსებობა, მაშინ იდება საბოლოო შედეგი.

როდესაც ანალიზები გაშიფრულია, თქვენ უნდა იცოდეთ, რომ დადებითი აივ ტესტი განისაზღვრება:

• 60%-დან 65%-მდე ინფიცირებიდან 28 დღის შემდეგ;
• 80% -ში - 42 დღის შემდეგ;
• 90% -ში - 56 დღის შემდეგ;
• 95%-ში - 84 დღის შემდეგ.

თუ აივ-ზე პასუხი დადებითია, ეს ნიშნავს, რომ აღმოჩენილია ვირუსის ანტისხეულები. ცრუ დადებითი პასუხის თავიდან ასაცილებლად აუცილებელია ხელახალი ტესტირება, სასურველია ორჯერ. თუ იმუნოდეფიციტის საწინააღმდეგო ანტისხეულები გამოვლინდა ორიდან ორი ტესტის გავლისას ან მათგან 2-ში 3 ტესტის გავლისას, მაშინ ითვლება, რომ შედეგი დადებითია.

p24 ანტიგენი შეიძლება გამოვლინდეს სისხლში ინფექციის დღიდან 14 დღის შემდეგ. ფერმენტული იმუნოანალიზის მეთოდის გამოყენებით, ეს ანტიგენი გამოვლენილია 14-დან 56 დღემდე. 60 დღის შემდეგ ის სისხლში აღარ არის. მხოლოდ მაშინ, როდესაც ორგანიზმში შიდსი ყალიბდება, ხდება ამ p24 ცილის ხელახალი ზრდა სისხლში. ამიტომ, ფერმენტული იმუნოანალიზის ტესტის სისტემები გამოიყენება აივ ინფექციის აღმოსაჩენად ინფექციის პირველ დღეებში ან იმის დასადგენად, თუ როგორ პროგრესირებს დაავადება და აკონტროლებენ მკურნალობის პროცესს. ფერმენტული იმუნოანალიზის მაღალი ანალიზური მგრძნობელობა აღმოაჩენს p24 ანტიგენს ბიოლოგიურ მასალაში აივ-ისთვის პირველი ქვეტიპის კონცენტრაციით 5-დან 10 პგ/მლ-მდე, მეორე ქვეტიპის აივ-ისთვის 0,5 ნგ/მლ ან ნაკლებიდან.

ქვეშ საეჭვოფერმენტული იმუნოანალიზის შედეგი გულისხმობს, რომ დიაგნოზი სადღაც შეცდა, როგორც წესი, მედიცინის მუშაკები რაღაცას ურევდნენ, ან ადამიანს აქვს ინფექციის ნიშნები და შედეგი უარყოფითია, რაც იწვევს ეჭვს, ადამიანი იგზავნება ხელახალი ტესტირებისთვის. .

ქვეშ ცრუ დადებითიშედეგი გაგებულია, როგორც შედეგი, როდესაც სისხლის ანალიზი ჩატარდა პაციენტის შემდეგ პირობებში:

• ორსულობა;
• თუ ადამიანს აქვს ჰორმონალური დისბალანსი;
• გახანგრძლივებული იმუნოსუპრესიით.

როგორ გავშიფროთ ანალიზი ამ შემთხვევაში? ცრუ დადებითი შედეგი მიიღება თუ გამოვლინდა მინიმუმ ერთი ცილა. გამომდინარე იქიდან, რომ p24 ანტიგენი ძალიან არის დამოკიდებული ინდივიდუალურ ვარიაციებზე, ამ მეთოდის გამოყენებით, ინფექციის პირველ პერიოდში გამოვლენილია პაციენტების 20%-დან 30%-მდე.

რამდენად სანდოა ტესტის დადებითი შედეგი?

ზოგჯერ ELISA-ს აქვს ცრუ დადებითი შედეგები (დაახლოებით 1% შემთხვევაში), ამ შედეგის მიზეზი შეიძლება იყოს ორსულობა, სხვადასხვა ვირუსული ინფექციები, ასევე მარტივი უბედური შემთხვევა. დადებითი შედეგის მიღების შემდეგ საჭიროა უფრო ზუსტი ტესტი - იმუნობლოტი, რომლის შედეგების მიხედვით დგება დიაგნოზი. დადებითი ELISA-ს შემდეგ დადებითი იმუნობლოტის შედეგი 99,9% სანდოა - ეს არის მაქსიმალური სიზუსტე ნებისმიერი სამედიცინო ტესტისთვის. თუ იმუნობლოტი უარყოფითია, მაშინ პირველი ტესტი იყო ცრუ დადებითი და ფაქტიურად ადამიანს არ აქვს აივ.

რა არის განუსაზღვრელი (საეჭვო) შედეგი?

თუ ELISA დადებითი ან უარყოფითია, მაშინ იმუნობლოტი შეიძლება იყოს დადებითი, უარყოფითი ან განუსაზღვრელი. განუსაზღვრელი იმუნობლოტის შედეგი, ე.ი. იმუნობლოტში ვირუსის სულ მცირე ერთი ცილის არსებობა შეიძლება შეინიშნოს, თუ ინფექცია ახლახან მოხდა და სისხლში ჯერ კიდევ ცოტაა აივ-ის ანტისხეულები, ამ შემთხვევაში იმუნობლოტი გარკვეული პერიოდის შემდეგ გახდება დადებითი. ასევე, გაურკვეველი შედეგი შეიძლება გამოჩნდეს ჰეპატიტით აივ ინფექციის არარსებობის, ზოგიერთი ქრონიკული მეტაბოლური დაავადების ან ორსულობის დროს. ამ შემთხვევაში ან იმუნობლოტი გახდება უარყოფითი, ან გაურკვეველი შედეგის მიზეზი დადგინდება.

რა ღირს ანალიზი?

აივ ინფექციის იმუნობლოტი არ ვრცელდება იაფ კვლევებზე. საშუალოდ, ფერმენტული იმუნოანალიზის სკრინინგული გამოკვლევა 500-დან 900 რუბლამდე ღირს. იმუნობლოტირება არის გადამოწმების კვლევა, რომლის ღირებულებაა სამიდან ხუთ ათას რუბლამდე. უფრო რთული მეთოდები გაცილებით ძვირია. მაგალითად, პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქციის (PCR) ანალიზისთვის დაგჭირდებათ დაახლოებით 12000 რუბლის გადახდა.

სად გავაკეთო ანალიზი?

სად შეიძლება გავიკეთო ტესტირება აივ-ზე? ELISA, იმუნობლოტის კვლევები ტარდება ქალაქურ კერძო კლინიკებში, შედეგები გაიცემა ერთი დღის განმავლობაში. ასევე შესაძლებელია დაუყოვნებელი დიაგნოზი. სახელმწიფო სამედიცინო დაწესებულებებში ELISA ტესტები და იმუნობლოტირება ტარდება უფასოდ, რუსეთის ფედერაციის კანონმდებლობის შესაბამისად. ორსულ ქალებს, ისევე როგორც პაციენტებს, რომლებსაც ჰოსპიტალიზაცია ან ოპერაცია უნდა ჩაუტარდეთ, უნდა გაიარონ ინფექციური დაავადებები.

ჰიპოტენზია, ტაქიკარდია, ქოშინი, ციანოზი. დაავადების მძიმე შემთხვევებში შესაძლებელია სისხლდენა, ღებინება სისხლის შერევით. ღვიძლი და ელენთა გადიდებულია. გაითვალისწინეთ ოლიგურია. ტემპერატურა მუდმივად მაღალი რჩება 3-10 დღის განმავლობაში. პერიფერიულ სისხლში - ნეიტროფილური ლეიკოციტოზი ფორმულის მარცხნივ გადანაცვლებით. ჭირის აღწერილი ზოგადი გამოვლინების გარდა, ვითარდება დაავადების ცალკეული კლინიკური ფორმებისთვის დამახასიათებელი დაზიანებები.

კანის ფორმა იშვიათია (3-5%). ინფექციის შესასვლელი კარიბჭის ადგილზე ჩნდება ლაქა, შემდეგ პაპულა, ვეზიკულა (კონფლიქტი), სავსე სეროზული ჰემორაგიული შიგთავსით, გარშემორტყმული ჰიპერემიით და შეშუპებით ინფილტრირებული ზონით. Flikten ახასიათებს ძლიერი ტკივილი. გახსნისას წარმოიქმნება წყლული, რომელსაც ბოლოში მუქი ნაწიბური აქვს. ჭირის წყლული ხასიათდება ხანგრძლივი მიმდინარეობით, ნელა კურნავს, ნაწიბურის წარმოქმნას. თუ ეს ფორმა გართულებულია სეპტიცემიით, წარმოიქმნება მეორადი პუსტულები და წყლულები. შესაძლოა, რეგიონალური ბუბოს განვითარება (კან-ბუბონური ფორმა).

ბუბონური ფორმა გვხვდება ყველაზე ხშირად (დაახლოებით 80%) და ხასიათდება შედარებით კეთილთვისებიანი მიმდინარეობით. დაავადების პირველივე დღეებიდან ჩნდება მკვეთრი ტკივილი რეგიონული ლიმფური კვანძების მიდამოში, რაც ართულებს მოძრაობას და აიძულებს პაციენტს იძულებითი პოზა. პირველადი ბუბო, როგორც წესი, არის მარტოხელა, მრავლობითი ბუბო ნაკლებად ხშირად შეიმჩნევა. უმეტეს შემთხვევაში, საზარდულის და ბარძაყის ლიმფური კვანძები ზიანდება, აქსილარული და საშვილოსნოს ყელის ლიმფური კვანძები გარკვეულწილად ნაკლებად გავრცელებულია. ბუბოს ზომები განსხვავდება კაკლიდან საშუალო ზომის ვაშლამდე. ნათელი ნიშნებია მკვეთრი ტკივილი, მკვრივი თანმიმდევრულობა, ქვევით ქსოვილებთან მიბმა, კონტურების სიგლუვეს პერიადენიტის განვითარების გამო. ბუბო იწყებს ფორმირებას ავადმყოფობის მეორე დღეს. როდესაც ის ვითარდება, მასზე კანი წითლდება, ბზინავს, ხშირად ციანოზს. თავიდან მკვრივია, მერე რბილდება, ჩნდება რყევა, კონტურები ბუნდოვანი ხდება. ავადმყოფობის მე-10-12 დღეს იხსნება - ფისტულა, წარმოიქმნება წყლული. დაავადების კეთილთვისებიანი მიმდინარეობისა და თანამედროვე ანტიბიოტიკოთერაპიის დროს შეინიშნება მისი რეზორბცია ან სკლეროზი. გამომწვევის ჰემატოგენური შეყვანის შედეგად შეიძლება წარმოიქმნას მეორადი ბუბოები, რომლებიც მოგვიანებით ჩნდება და არის მცირე ზომის, ნაკლებად მტკივნეული და, როგორც წესი, არ ჩირქდება. ამ ფორმის საშინელი გართულება შეიძლება იყოს მეორადი ფილტვის ან მეორადი სეპტიური ფორმის განვითარება, რაც მკვეთრად აუარესებს პაციენტის მდგომარეობას, სიკვდილამდე.

პირველადი ფილტვისფორმა იშვიათია, ეპიდემიის პერიოდში შემთხვევათა 5-10%-ში და წარმოადგენს დაავადების ყველაზე ეპიდემიოლოგიურად საშიშ და მძიმე კლინიკურ ფორმას. იწყება მკვეთრად, ძალადობრივად. გამოხატული ინტოქსიკაციის სინდრომის ფონზე პირველივე დღეებიდან ჩნდება მშრალი ხველა, ძლიერი ქოშინი, გულმკერდის არეში მოჭრილი ტკივილები. ხველა შემდეგ ხდება პროდუქტიული, წარმოქმნის ნახველს, რომელიც შეიძლება განსხვავდებოდეს რამდენიმე წვეთიდან უზარმაზარ რაოდენობამდე, იშვიათად საერთოდ არ არსებობს. ნახველი, თავდაპირველად ქაფიანი, შუშისებრი, გამჭვირვალე, შემდეგ იძენს სისხლიან იერს, მოგვიანებით ხდება წმინდა სისხლიანი, შეიცავს უამრავ ჭირის ბაქტერიას. როგორც წესი, ეს არის თხევადი კონსისტენცია - ერთ-ერთი სადიაგნოსტიკო ნიშანი. ფიზიკური მონაცემები მწირია: დაზიანებულ წილზე პერკუსიის ხმის უმნიშვნელო დამოკლება, აუსკულტაციის დროს, უხვი ბუშტუკოვანი ბუშტუკები, რაც აშკარად არ შეესაბამება პაციენტის ზოგად მძიმე მდგომარეობას. ტერმინალურ პერიოდს ახასიათებს ქოშინის მომატება, ციანოზი, სტუპორის განვითარებით, ფილტვის შეშუპება და TSS. არტერიული წნევა ეცემა, პულსი აჩქარდება და ძაფისებრი ხდება, გულის ხმები იკუმშება, ჰიპერთერმიას ცვლის ჰიპოთერმია. მკურნალობის არარსებობის შემთხვევაში, დაავადება ფატალურია 2-6 დღის განმავლობაში. ანტიბიოტიკების ადრეული გამოყენებისას დაავადების მიმდინარეობა კეთილთვისებიანია, ოდნავ განსხვავდება

MPBA-Blot-HIV-1, HIV-2 რეაგენტის ნაკრები შექმნილია იმისათვის, რომ დაადასტუროს ანტისხეულების გამოვლენა აივ-1 და/ან აივ-1 ჯგუფის O და/ან აივ-2-ის ინდივიდუალური ცილების (ანტიგენების) მიმართ ადამიანის შრატში ან პლაზმა იმუნური ბლოტის მეთოდით.

Გამორჩეული მახასიათებლები:

• რეაგენტების კომპლექტი "MPBA - Blot - HIV-1, HIV-2" შეიცავს აივ 1-ის გასუფთავებულ ლიზატულ ვირუსულ ცილებს და აივ-2-ის პეპტიდ-ანტიგენურ დეტერმინატს gp36;
• უზრუნველყოფს აივ-1-ის, აივ-1 ჯგუფის O, აივ 2-ის ანტისხეულების გამოვლენას ერთ ზოლზე;
• ანალიზის მომზადებისა და ჩატარების მარტივი პროცედურა;
• რეაქციის შიდა ხარისხის კონტროლი*
• ანალიზის მაქსიმალური სიჩქარე (3 საათი);
• ტესტის ნიმუშის მცირე მოცულობა - 20 μl;
• არ საჭიროებს დამატებით აღჭურვილობას კვლევისთვის;
• ნაკრების ხარისხი გარანტირებულია რუსული და საერთაშორისო სტანდარტების ნიმუშების გამოყენებით**

* ხარისხის შიდა კონტროლი უზრუნველყოფილია:

• შიდა კონტროლის ზოლები, უზრუნველყოფს შრატის ან პლაზმის ნიმუშის შეყვანის კონტროლს;
• საკონტროლო უარყოფითი შრატი (K-);
• კონტროლის პოზიტიური შრატი (K+), რომელიც საშუალებას იძლევა იდენტიფიცირდეს ზოლებზე გამოვლენილი ზოლები;
• აკონტროლეთ სუსტად დადებითი შრატი (K + cl), რომელიც უზრუნველყოფს რეაგენტის ნაკრების მგრძნობელობის კონტროლს.

**Ხარისხის გარანტია:

MPBA-Blot-HIV-1, HIV-2 რეაგენტის ნაკრების მახასიათებლები განისაზღვრა დონორთა შემთხვევითი ნიმუშის, აივ ინფექციით დიაგნოზირებული პაციენტების, კომერციული სეროკონვერტაციის პანელების, სტანდარტული პანელების და ნიმუშების ტესტირებით, რომლებსაც აქვთ „პოტენციური ჩარევა“. განსაზღვრის" კომპონენტები.

რეაგენტების ნაკრები არ იძლევა ცრუ დადებით შედეგებს სტანდარტული პანელის შრატების შესწავლისას, რომლებიც არ შეიცავს ანტისხეულებს აივ 1.2 და აივ-1 ანტიგენის მიმართ ("Standard AT (-) HIV", No. FSR 2007/00953 დათარიღებული 10.25 .2007). სპეციფიკა - 100%.

დიაგნოსტიკური სპეციფიკა განისაზღვრა 200 დონორის შემთხვევითი ნიმუშის გამოკვლევით სხვადასხვა სისხლის ცენტრიდან და კლინიკიდან აივ-1, აივ-2 ინფექციის წინასწარ დადასტურებული არარსებობით. დონორთა შემთხვევითი შერჩევის შესწავლის სპეციფიკა იყო 100%;

რეაგენტის ნაკრების სპეციფიკა განისაზღვრა 250 ნიმუშის შესწავლისას, მათ შორის შრატის ან პლაზმის ნიმუშები, მიღებული ორსული ქალებისგან, ჰოსპიტალიზებული პაციენტებისგან, C და E ჰეპატიტით დაავადებული პაციენტებისგან და ნიმუშები "პოტენციურად ჩარევის განსაზღვრის" კომპონენტებით. MPBA-Blot-HIV-1, HIV-2 ნაკრების გამოყენებისას ამ ნიმუშებზე ცრუ დადებითი შედეგი არ იქნა ნაპოვნი.

დიაგნოსტიკური მგრძნობელობა განისაზღვრა გამოყენებით:
- პლაზმის ნიმუშები Boston Biomedica, Inc HIV-1 პანელიდან (WWRB 301) სხვადასხვა რეგიონიდან, რომლებიც შეიცავს აივ-1-ის სხვადასხვა ქვეტიპებს: ჯგუფი M (ქვეტიპები A, B, C, D, E, F) და ჯგუფი O; რეაგენტის ნაკრების მგრძნობელობა იყო 100%;

რეაგენტის ნაკრების მგრძნობელობა განისაზღვრა საერთაშორისო სეროკონვერტაციის პანელების შესწავლისას Boston Biomedica, Inc (SeraCare Life Sciences), cat. Nrs. PRB 903, PRB 904, PRB 909, PRB 912, PRB 916, PRB 917, PRB 918, PRB 919, PRB 921, PRB 923, PRB 924, PRB 929, PRB29, PRB 929, PRB29

რეაგენტების ნაკრები აღმოაჩენს აივ-1-ის ანტისხეულებს სტანდარტული პანელის შრატში, რომელიც შეიცავს აივ-1-ის ანტისხეულებს (“Standard AT (+) HIV-1”, No. FSR 2007/00953, 2007 წლის 25 ოქტომბერი), აღმოაჩენს ანტისხეულებს. აივ-2-ს სტანდარტული პანელის შრატში, რომელიც შეიცავს აივ-2-ის ანტისხეულებს ("Standard AT (+) HIV-2", No. FSR 2007/00953 of 10/25/2007). მგრძნობელობა - 100%.

სარეგისტრაციო მოწმობა No. FSR 2010/07958 2011 წლის 13 ივლისით (მოქმედების შეუზღუდავია)

შემადგენლობა:

• იმუნოსორბენტი. თეთრი ნიტროცელულოზის მემბრანის ზოლები ინდივიდუალური აივ-1 პროტეინებით (gp160, gp120, p66, p55, p51, gp41, p31, p24, p17), ადსორბირდება მათზე ელექტროგადაცემის მეთოდით და გამოიყენება ზოლზე სინთეზური აივ-2 პეპტიდით, gp36 პროტეინის და ანტი-IgG ადამიანის ანალოგი (შიდა კონტროლი) - 18 ც.;
• K- - კონტროლის უარყოფითი შრატი. ადამიანის სისხლის შრატი, რომელიც არ შეიცავს ანტისხეულებს აივ-1,2, HCV, აივ ანტიგენის, HBsAg-ის მიმართ, ინაქტივირებულია 560C ტემპერატურაზე გაცხელებით; გამჭვირვალე ღია ყვითელი სითხე - 1 სინჯარა (0,08 მლ). შეიცავს კონსერვანტებს: თიმეროსალს და ნატრიუმის აზიდს;
• K+ - საკონტროლო დადებითი შრატი. ადამიანის სისხლის შრატი, რომელიც შეიცავს აივ-1,2-ის ანტისხეულებს (ტიტრი არანაკლებ 1:10000), არ შეიცავს HBsAg, აივ ანტიგენს, HCV ანტისხეულებს, ინაქტივირებულია 560C ტემპერატურაზე გაცხელებით; გამჭვირვალე ღია ყვითელი სითხე - 1 სინჯარა (0,08 მლ) შეიცავს კონსერვანტებს: თიმეროსალს და ნატრიუმის აზიდს;
• K+sl - კონტროლი სუსტად დადებითი შრატი. ადამიანის სისხლის შრატი, რომელიც შეიცავს აივ-1,2-ის ანტისხეულებს (ტიტრი არაუმეტეს 1:200), არ შეიცავს HBsAg, აივ ანტიგენს, HCV ანტისხეულებს, ინაქტივირებულია 560C ტემპერატურაზე გაცხელებით; გამჭვირვალე ღია ყვითელი სითხე - 1 სინჯარა (0,08 მლ). შეიცავს კონსერვანტებს: თიმეროსალს და ნატრიუმის აზიდს;
• RROKk (x10) - ნიმუშების და კონიუგატის განზავების ხსნარი. კონცენტრატი - ტრის ბუფერი, რომელიც შეიცავს წინასწარ დამუშავებულ ნორმალურ თხის შრატს; გაუმჭვირვალე ნაცრისფერი სითხე - 1 ფლაკონი (10 მლ). შეიცავს კონსერვანტს: თიმეროსალს;
• PRk (x20) - სარეცხი ხსნარი. კონცენტრატი - ტრის ბუფერი, რომელიც შეიცავს Tween-20-ს; გამჭვირვალე უფერო სითხე - 1 ფლაკონი (70 მლ). შეიცავს კონსერვანტს: თიმეროსალს;
• კონიუგატი. თხის ანტისხეულები ადამიანის IgG-ს მიმართ, კონიუგირებული ტუტე ფოსფატაზასთან; გამჭვირვალე უფერო სითხე - 1 სინჯარა (0,06 მლ);
• სუბსტრატი (ფერადი ხსნარი). 5-ბრომო-4-ფტორ-ინდოლილ-ფოსფატის (BCIP) და ნიტროზინის ტეტრაზოლიუმის (NBT) ხსნარი; გამჭვირვალე ღია ყვითელი სითხე - 1 ფლაკონი (50 მლ);
• ფხვნილი იმუნური ბლოტისთვის. უცხიმო რძის ფხვნილი - ამორფული თეთრი ან ღია ყვითელი ფხვნილი - 5 შეკვრა x 1გ;
• ტაბლეტი სახურავით რეაქციის დასაყენებლად - 2 ცალი;
• პლასტიკური პინცეტი - 1 ცალი.