Полная интерпретация анализов на сифилис. Какие анализы крови сдают на сифилис и как их расшифровывают Рпр положительный

Работает он посредством определения антител против кардиолипина. Кардиолипин – особый белок, который обнаруживается в мембранах бактерий и митохондрий.

Сифилис – инфекционная болезнь, относящаяся к ЗППП (заболевания, передающиеся половым путем). Сифилис является системным заболеванием, способным поражать любые ткани и органы. Течение сифилиса является хроническим, без лечения болезнь может длиться годами, постепенно разрушая организм.

Чаще всего сифилис передается при незащищенном сексе. Болезнь может передаваться вертикальным путем, то есть . Опасность сифилиса в том, что долгое время заболевание может . Тем не менее, инфекционный процесс в это время не прекращается, нанося урон человеку.

Что такое RPR анализ на сифилис?

Этот анализ – более современная и точная версия реакции Вассермана. Когда заболевание повреждает клетки организма, из них высвобождается липоидный материал. RPR анализ направлен на выявление реагинов. Реагины - особые антитела к липоидным веществам.

Когда назначается анализ RPR на сифилис?

Такой анализ назначается при обследовании, если есть подозрение на сифилис. Врач может назначить RPR, чтобы уточнить, нет ли скрытого сифилиса. Реакцией RPR обследуют потенциальных доноров, этот анализ берут при скрининговых обследованиях. Помимо этого, анализ RPR назначают для уточнения эффективности лечения. Да, тест позволяет отслеживать . Если за год лечения титр анализа RPR понижается минимум в 4 раза, терапия считается эффективной.

по применению «Люис RPR тест»

Набор реагентов для быстрого определения реагиновых антител к кардиолипину, лецитину, холестерину в плазме или сыворотке крови человека при диагностике сифилиса

1. НАЗНАЧЕНИЕ

Набор реагентов «Люис RPR тест», далее по тексту – Набор, предназначен для диагностики сифилиса с использованием нетрепонемного теста.

2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА

2.1. Принцип действия

В «Люис RPR тест» диагностикум приготовлен на основе раствора холестерина, кардиолипина и лецитина, к которому добавлены частицы угля для облегчения визуального учета результатов. При взаимодействии антигена с реагиновыми антителами сыворотки образуются агрегаты черного цвета, видимые невооруженным глазом. В отсутствии реагиновых антител частицы угля остаются в мелкодисперсном состоянии.

^ 2.2. Состав набора

Ингредиент	Количество	Описание
Диагностикум	5 мл (два флакона)	Смесь кардиолипина, лецитина и холестерина с добавлением мелкодисперсных частиц угля. Суспензия черного цвета, при хранении разделяется на 2 фракции: верхнюю – прозрачную бесцветную жидкость, нижнюю – осадок черного цвета (взвесь частиц угля). Содержит консервант – азид натрия в концентрации 0,1%.
Положительный контрольный образец (К+)	1 мл (один флакон)	Сыворотка крови человека с клинически и серологически подтвержденным диагнозом сифилиса, содержащая реагиновые антитела к кардиолипину, лецитину, холестерину – инактивированная прозрачная жидкость, бесцветная или слегка желтоватого цвета. Содержит консервант - азид натрия в концентрации 0,1%.
Отрицательный контрольный образец (К-)	1 мл (один флакон)	Сыворотка крови человека, не содержащая реагиновые антитела к кардиолипину, лецитину, холестерину и к Treponema pallidum – инактивированная прозрачная жидкость, бесцветная или слегка желтоватого цвета. Содержит консервант – азид натрия в концентрации 0,1%.
Пластинки для реакции	50 шт (одна упаковка)	Карточки из ламинированного пластиком картона с 10-ю полями для постановки реакции с окрашенными окружностями, в пакете из полиэтилена.
Палочки для смешивания	500 шт (одна упаковка)	Деревянные, в пакете из полиэтилена.
Флакон для розлива	3 мл (одна штука)	Из прозрачного пластика в пакете из полиэтилена.
Игла для розлива (20 размер)	1 шт	В пакете из полиэтилена.

^

Набор рассчитан на проведение 500 определений.

3. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

● При работе с образцами сыворотки (или плазмы) крови пациентов следует обращаться как с потенциально инфекционными объектами, соблюдая меры предосторожности (СП 3.3.2.1288-03).

● Не разрешается модифицировать процедуру проведения анализа, сокращать продолжительность времени постановки реакции, использовать реагенты других производителей, а также реагенты других серий Набора «Люис RPR тест».

● Необходимо предусмотреть меры по предотвращению перекрестной контаминации реагентов.

● Компоненты «Люис RPR тест» содержат 0,1% азид натрия в качестве консерванта, который может быть токсичен при попадании внутрь.

^ 4. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ АНАЛИЗА

1. Полуавтоматические дозаторы со сменными наконечниками, с диапазоном дозирования жидкости 10-100 мкл, 100-1000 мкл;

2. Таймер;

3. Холодильник;

4. Перчатки латексные;

5. Миксер с орбитальным вращением SHAKER S3 или аналогичный орбитальный ротатор.

^ 5. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

В реакции могут быть использованы прогретые и непрогретые сыворотки или плазма крови пациента. Нельзя использовать образцы со следами бактериального пророста, гемолизированные или хилезные. Допускается хранение проб при температуре минус 20 °С в течение 4-6 недель.

^ 6. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

6.1. Подготовка растворов и реагентов

1. 
   Все реагенты и пробы до начала проведения анализа выдержать 30 мин при температуре от 18 до 25 °С.
2. 
   Перед употреблением хорошо взболтать суспензию диагностикума (флакон 1).
3. 
   Приготовить систему для розлива диагностикума. Для этого снять крышку с пластикового флакона для розлива и плотно подсоединить иглу к его горлышку. Для заполнения системы сжать флакон и опустить конец иглы в суспензию диагностикума (флакон 1). Ослабить давление на пластиковый флакон, чтобы суспензия набралась внутрь. Возможно использование пипеточного дозатора со сменным наконечником.

ПРИМЕЧАНИЕ :

Хранение диагностикума в пластиковом флаконе сокращает срок его годности. Оставшуюся после тестирования суспензию перелить в исходный стеклянный флакон. После этого пластиковый флакон с иглой промыть дистиллированной водой и высушить на воздухе.

1. 
   После вскрытия упаковки с пластинками для реакции хранить их только при температуре от 18 до 25 °С. Не прикасаться пальцами к кружкам.

^ 6.2. Проведение анализа

Качественный метод.

1. 
   С помощью полуавтоматического дозатора нанести 50 мкл сыворотки или плазмы на кружок пластинки.
2. 
   С помощью пластикового флакона для розлива с насаженной иглой (или полуавтоматическим дозатором) нанести на кружок 1 каплю (16 мкл) диагностикума рядом с каплей сыворотки, не смешивая.
3. 
   С помощью палочки для смешивания соединить обе капли, равномерно распределив их по всей поверхности кружка.
4. 
   Поместить пластинку на платформу орбитального ротатора и вращать в горизонтальной плоскости в течение 8 мин при скорости 100 об/мин.
5. 
   

ПРИМЕЧАНИЕ:

Каждая постановка должна обязательно включать реакцию с положительным (К+, флакон 2) и отрицательным (К-, флакон 3) контрольными образцами, входящими в состав набора. Реакция с контрольными образцами ставится аналогично вышеописанной схеме проведения качественного анализа.

^ Полуколичественный метод.

Реакция проводится с серийными разведениями (1:2 – 1:1024) тестируемого образца сыворотки в 0,9% растворе натрия хлорида (физиологическом растворе), осуществляемыми с помощью полуавтоматического дозатора:

1. 
   Нанести по 50 мкл физиологического раствора на кружки для тестирования.
2. 
   Добавить 50 мкл сыворотки или плазмы в кружок №1 и перемешать несколько раз с физиологическим раствором, набирая и выпуская сыворотку с помощью автоматического пипеточного дозатора.
3. 
   Той же автоматической пипеткой-дозатором перенести 50 мкл в кружок №2 и повторить процедуру смешивания. Перенести 50 мкл в кружок №3.
4. 
   Повторить ту же процедуру с кружками № 3-10, перенося по 50 мкл соответствующего разведения в следующий кружок. В результате должны получить тестируемые сыворотки в разведениях 1:2; 1:4; 1:8; 1:16; 1:32; 1:64; 1:128; 1:256; 1:512; 1:1024. Из последнего кружка удалить 50 мкл.
5. 
   С помощью пластикового флакона для розлива с насаженной иглой нанести на каждый кружок 1 каплю (16 мкл) диагностикума рядом с каждой каплей разведенной сыворотки, не смешивая.
6. 
   С помощью палочки для смешивания смешать обе капли, распределив их по всей поверхности каждого кружка (от большего разведения к меньшему).
7. 
   Поместить пластинку на платформу орбитального ротатора и вращать в горизонтальной плоскости 8 мин при скорости 100 об/мин.
8. 
   Немедленно произвести учет результатов (не допускать высыхания).

^ 7. РЕГИСТРАЦИЯ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

7.1. Интерпретация результатов при качественном анализе:

Учет результатов проводится визуально при хорошем освещении:

ПОЛОЖИТЕЛЬНАЯ РЕАКЦИЯ - Наличие средних и больших

Агрегатов при просветлении

Реакционной среды

СЛАБАЯ РЕАКЦИЯ - Образование редких

Небольших агрегатов

ОТРИЦАТЕЛЬНАЯ РЕАКЦИЯ - Видимые агрегаты отсутствуют,

Наблюдается равномерное

Распределение частиц

Равномерного серого цвета

Реакция К+ в присутствии - Средние и большие агрегаты

диагностикума

Реакция К- в присутствии - Видимые агрегаты отсутствуют,

Диагностикума наблюдается равномерное

Распределение частиц

^ 7.2. Интерпретация результатов при полуколичественном анализе:

Учет результатов производят визуально при хорошем освещении, как описано для качественного анализа. Титром образца следует считать последнее разведение, в котором определяется слабоположительный результат. Титр К+ в присутствии диагностикума ≥ 1:2. Титр К- в присутствии диагностикума отсутствует.

ПРИМЕЧАНИЕ :

Следует иметь в виду, что при использовании «Люис RPR тест» иногда наблюдаются ложноположительные реакции у больных с другими заболеваниями. Поэтому любой положительный результат должен быть проконтролирован с помощью метода, использующего специфический трепонемный антиген, например «Люис РПГА тест» (производства ООО «НИАРМЕДИК ПЛЮС»), либо других специфических наборов реагентов.

Метод определения Флокуляционный (RPR-антиген, использующийся в наборах, является модификацией VDRL антигена).

Исследуемый материал Сыворотка крови

Доступен выезд на дом

Неспецифический антифосфолипидный (реагиновый) тест, современный аналог реакции Вассермана (RW), модификация VDRL (Venereal Disease Research Laboratory) теста.

RPR - скрининговый нетрепонемный тест, выявляющий антитела (реагины) класса IgG и IgM к липоидному и липопротеиноподобному материалу, высвобождаемому из повреждённых клеток больного сифилисом.

Антифосфолипидные антитела, выявляемые этим тестом, находят у 70 - 80% лиц с первичным сифилисом и почти у 100% пациентов с вторичным и ранним латентным сифилисом. В большинстве случаев позитивная RPR-реакция наблюдается через 7 - 10 дней после появления первичного шанкра или через 3 - 5 недель после инфицирования. Титры снижаются после наступления вторичной стадии сифилиса. Около 30% пациентов с поздним сифилисом становятся нереактивными по RPR-тесту. Снижение титра RPR в 4 и более раз в течение 1 года после проведённой терапии подтверждает её эффективность. В 90 - 98% случаев после лечения сифилиса результат RPR-теста становится отрицательным.

Тест не является специфическим. Поэтому иногда возможно возникновение ложноположительных реакций. Антилипоидные антитела могут появляться не только вследствие сифилиса или других трепонемных инфекций, но и в ответ на развитие нетрепонемных заболеваний острой или хронической природы, при которых наблюдается повреждение тканей (особенно часто при аутоиммунных заболеваниях).

При получении положительного результата в RPR-тесте, пациент должен обследоваться дерматовенерологом с повторным исследованием крови с помощью специфического трепонемного диагностического теста (в лаборатории ИНВИТРО — тест , антитела к Treponema pallidum IgG/IgM, выявляющий специфические антитела к антигену Treponema pallidum).

Редкие ложноотрицательные результаты в реакции RPR (эффект «прозоны» при очень высоких титрах реагиновых антител) могут быть исключены одновременным назначением теста сифилис ИФА IgG/IgM. Эти два исследования являются взаимодополняющими; комбинированное использование тестов RPR и ИФА-теста IgG/IgM представляет лучший вариант скринингового исследования для обнаружения или исключения сифилиса на всех стадиях.

Особенности инфекции. Сифилис - хроническое инфекционное заболевание, характеризующееся мультисистемным поражением организма. Возбудитель сифилиса - Treponema pallidum - неустойчива в окружающей среде, но хорошо сохраняется во влажных биологических материалах (сперме, влагалищном секрете, слизи, гное и др.). Передаётся половым, парентеральным, бытовым, трансплацентарным путями. Увеличивают риск заражения другие инфекции, передающиеся половым путём: герпес, хламидиоз, папилломавирусная инфекция и др., а также повреждение слизистой оболочки при анальных контактах. Бледная трепонема имеет несколько антигенов, обусловливающих выработку антител. Один из них аналогичен кардиолипину, что позволяет использовать последний для обнаружения иммунитета к бледной трепонеме.

Заражение от больного человека возможно в любом периоде сифилиса. Наиболее инфекционными являются первичный и вторичный сифилис при наличии активных проявлений на коже и слизистых оболочках. Бледная трепонема проникает через микроповреждения кожи или слизистых в лимфатические сосуды, затем в лимфатические узлы. Далее возбудитель распространяется по органам и может определяться во всех биологических средах (слюне, грудном молоке, сперме и т.д.).

При классическом течении инкубационный период длится 3 - 4 недели, первичный серонегативный - 1 месяц, затем первичный серопозитивный - 1 месяц, затем вторичный период - 2 - 4 года, далее третичный период. В первичном периоде возникает твёрдый шанкр (безболезненная язва или эрозия с плотным дном в месте проникновения бледной трепонемы), сопровождающийся регионарным лимфангиитом и лимфаденитом. В конце первичного периода шанкр самостоятельно заживает, а лимфаденит переходит в полиаденит и сохраняется до пяти месяцев.

Первое генерализованное высыпание является признаком начала вторичного периода. Вторичные сифилиды появляются волнообразно (на 1,5 - 2 месяца каждая волна) и самостоятельно исчезают. Могут быть представлены пятнистыми, папулезными, пустулезными сифилидами, сифилитической аллопецией (облысением) и сифилитической лейкодермой («ожерелье Венеры»). На втором полугодии вторичного сифилиса исчезает полиаденит.

Появление третичных сифилидов (бугорков и гумм) знаменует начало третичного периода, который наступает у 40% нелеченных и неполноценно леченных больных. Волны третичного периода разделены более продолжительными (иногда многолетними) периодами латентного течения инфекции. В поражённых органах и тканях возникают деструктивные изменения. В третичных сифилидах содержится крайне мало трепонем, поэтому они практически не заразны. Напряжённость иммунитета падает (т. к. уменьшается количество бледных трепонем), поэтому становится возможным новое инфицирование (ресуперинфекция).

Передача сифилиса потомству наиболее вероятна в первые три года заболевания. В результате возникают поздние выкидыши (на 12 - 16 неделе), мертворождение, ранний и поздний врождённый сифилис. Поражение плода наиболее вероятно на 5-м месяце беременности и в родах. Проявления раннего врождённого сифилиса возникают сразу после рождения и аналогичны проявлениям вторичного сифилиса. Сифилиды позднего врождённого сифилиса возникают в возрасте 5 - 17 лет и аналогичны проявлениям третичного сифилиса. К безусловным признакам относится триада Гетчинсона (гетчинсоновские зубы, паренхиматозный кератит, лабиринтная глухота).

Диагноз сифилиса должен быть подтвержден лабораторными исследованиями, однако, в некоторых случаях может быть обоснован, несмотря на отрицательные результаты серологических реакций.

Особое значение лабораторная диагностика сифилиса имеет у следующих категорий обследуемых.

В отличие от трихомонады или гонококка, бледную трепонему невозможно обнаружить в мазках. Если у человека нет явных признаков заболевания, то лучшим биологическим материалом для исследования с целью диагностики сифилиса является кровь. Анализ крови на сифилис достаточно надежен и тогда, когда у пациента имеются сифилиды.

Не удивляйтесь, если при медосмотре перед устройством на работу, операцией или при беременности вам предложат пройти исследование крови на сифилис. Это обычная процедура, предназначенная для скрининга населения. Таким образом выявляют носителей инфекции и больных на ранних стадиях.

Желание провести экспресс-диагностику может появиться у каждого, кто практиковал незащищенный секс или подозревает партнера в носительстве. Сегодня есть возможность самостоятельно совершить тестирование в домашних условиях.

Особое значение анализ крови на сифилис приобретает в процессе лечения инфекции: по результатам судят об эффективности выбранного метода терапии и делают выводы о выздоровлении пациента.

Направление на анализ можно получить не только у венеролога-дерматолога, но и у терапевта, гинеколога или уролога. Анализ по собственной инициативе делают, купив набор для экспресс-тестирования в аптеке.

Как подготовиться к процедуре

Для анализа крови на сифилис в разных случаях могут брать капиллярную или венозную кровь. Домашние экспресс-тесты дают ответ по одной капле крови из пальца. В этом случае специальной подготовки не требуется. Общая рекомендация: воздерживаться от курения непосредственно перед взятием пробы, а от алкоголя – на протяжении 24 часов.

Похожие требования выдвигаются и при заборе венозной крови. Для пациентов, имеющих проблемы с иммунитетом, дополнительно не советуют заниматься тяжелым физическим трудом накануне анализов. За день до взятия проб лучше употреблять легкую пищу, хорошо выспаться.

Сдача венозной крови проводится утром натощак.

Способы поиска трепонемы или ее следов

В основу лабораторных методов диагностики сифилиса по крови положена способность организма давать иммунный ответ на появление возбудителя. Поскольку исследуют плазму или сыворотку крови, то всю группу реакций назвали серологическими.

Серологическая диагностика сифилиса включает нетрепонемные и трепонемные реакции выявления антител. Первые чаще используют для скрининга и оценки эффективности лечения, а последние – для диагностики.

Впервые серодиагностику сифилиса провел Август Вассерман в 1906 году. До сегодняшнего времени она не потеряла актуальности и называется в честь разработчика – реакция Вассермана (РВ, RW) или реакция связывания комплемента (РСК).

За 100 лет лабораторная практика значительно развилась, и теперь антитела IgM и IgG выявляют следующими способами (таблица 1).

Нетрепонемные реакции

Термин «нетрепонемные» объединяет реакции, выявляющие антитела не к возбудителю, а к липидам разрушенных мембран трепонемы или клеток хозяина. При проведении реакции преципитации реагент (кардиолипиновый антиген) взаимодействует с антителами (если таковые имеются) и комплекс антиген-антитело выпадает в осадок. В пробирке образуются белые хлопья. Лаборант оценивает результат невооруженным глазом в случаях РПР, МПР, RST и TRUST или под микроскопом (VDRL, USR). Реакция считается:

• положительной при появлении крупных хлопьев (4+, 3+);
• слабоположительной при появлении хлопьев среднего размера (2+, 1+);
• отрицательный – хлопьев нет (-).

С момента инфицирования до позитивной реакции нетрепонемных тестов может пройти до 1,5 месяца. Твердый шанкр проявляет сифилис раньше теста на 1-4 недели.

Титр опадающих антител замеряют в ходе количественной реакции преципитации. Для этого плазму или сыворотку разбавляют по инструкции. Этот анализ характеризует эффективность лечения. Если титр падает, то выздоровление идет успешно, если положение дел не меняется – следует сменить препараты.

Когда идет речь о микрореакции, имеется в виду, что требуется несколько капель исследуемого материала. Такие тесты очень удобны для скрининга больших групп населения или проведения в домашних условиях. Наборы для анализа дешевы и выпускаются в стандартизированном виде. Например «Сифилис-АгКЛ-РМП» производства ЗАО «ЭКОлаб», «Профитест» от New Vision Diagnostics, SD BIOLINE производства Standard Diagnostics.

Недостатком реакций преципитации является их невысокая точность. Первичный сифилис РПР выявляет в диапазоне от 70 до 90%, вторичный – на 100%, а поздний – 30-50%. Ложноположительные результаты нетрепонемных тестов редки и встречаются в 3% случаев. Препятствием для получения точных результатов могут быть ошибки при заборе, хранении образцов крови или нарушение порядка проведения анализа.

По положительной реакции преципитации диагноз «сифилис» не ставится. Для принятия решения требуется выполнение специфических трепонемных тестов.

Трепонемные тесты

В крови больного можно выявить антитела непосредственно к антигенам трепонемы. Для этого разработаны специфические методы серодиагностики. Такие тесты характеризуются высокой чувствительностью.

1. Реакция Вассермана

Самой привычной и испытанной временем является реакция Вассермана (РВ) на сифилис. Для ее проведения берут 5 мл крови из локтевой вены, из пробы получают сыворотку, инактивируют собственный комплемент и потом одну часть обрабатывают трепонемным антигеном, а другую – кардиолипиновым.

Результат оценивают по скорости гемолиза:

• полная или значительная задержка гемолиза – положительная реакция (4+, 3+);
• частичная задержка – слабоположительная (2+);
• незначительная задержка – сомнительная реакция (1+);
• полный гемолиз – отрицательный результат (-).

Положительные качественные результаты перепроверяют количественным методом. Титром реагинов считают максимальное разведение сыворотки крови до полной или значимой задержки гемолиза. Количественный тест РВ назначают для оценки эффективности лечения.

Реакцию Вассермана есть смысл проводить через 2-3 недели после появления шанкра. Вторичный сифилис она покажет в 100% случаев, третичный – в 75%.

1. Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА)

Препарат для теста готовят из эритроцитов животных путем сенсибилизации антигеном Treponema pallidum. Клетки добавляют к сыворотке крови пациента. Время проведения теста – 1 час. В присутствии антител происходит реакция агглютинации, а лаборант видит специфические рисунки в микролунках.

Расшифровка теста:

• кольцо из агглютинированных клеток – положительный результат (4+, 3+, 2+);
• неплотное кольцо – сомнительный результат (+/-, 1+);
• точка в центре – отрицательный результат (-).

Реакцию пассивной гемагглютинации дает положительные результаты долго после излечения. Ложноположительный ответ можно получить в случаях заражения лепрой или мононуклеозом. Количественный РПГА проводят путем разведения проб.

1. Иммуноферментный анализ (ИФА)

Применяется для ранней диагностики сифилиса. Определяет наличие IgM, IgA, IgG антител к трепонеме при помощи иммуноглобулинов человека, меченных энзимом, и специального реагента. Ответ определяют по изменению цвета проб: чем больше антител, тем насыщеннее цвет смеси.

Метод очень чувствительный и специфичный. Он не дает ложноположительных результатов при наличии заражения пациентов другими инфекциями. Высокая чувствительность к антителам ограничивает возможность применения ИФА для контроля степени излечения.

1. Иммунофлюоресцентные тесты (РИФ)

Анализы этой группы позволяют оперативно выявить заражение трепонемой до появления шанкра. Дает положительные результаты к концу первой недели с момента инфицирования. Чувствительность близка к 100%. Действующим веществом теста являются флюоресцеины антител к человеческим глобулинам. Соединяясь с антителами сыворотки, они создают светящиеся комплексы. По интенсивности свечения определяют результат теста:

• желто-зеленое яркое свечение – 4+;
• зеленое – 3+;
• бледно-зеленое – 2+;
• еле заметное свечение – 1+;
• фоновое окрашивание или тени – отрицательный результат.

1. Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ)

Тест используется для выявления скрытых форм сифилиса. Он трудоемкий и технически сложный. В основу методики положен феномен обездвиживания живых трепонем комплексом «антиген + антитело». Бактерии для теста культивируют на кроликах. Вся посуда для анализа должна быть стерильной. Кровь у пациента берут при условии, что антибиотики он принимал не позднее месяца до дня анализа. К сыворотке добавляют трепонемы. В окуляре микроскопа лаборант ищет неподвижные бактерии.

Расшифровка результата:

• если иммобилизация трепонем больше, чем 50% – результат 4+;
• 31-50% – слабоположительный 3+;
• 21-30% – сомнительный 2+;
• до 20% – отрицательный.

1. Иммуноблот (Western-blot)

Самый современный метод диагностики сифилиса, исключающий ложноположительные ответы других специфических тестов. В клинической практике он используется, как подтверждающий. Сыворотку крови пациента наносят на нитроцеллюлозную мембрану, покрытую электрофоретически разделенными антигенами Treponema pallidum. При наличии антител IgG и IgM на тесте появляются полоски.

Интерпретация результатов тест-системы выполняется по положению полос и их интенсивности.

Окончательный диагноз ставят с учетом нетрепонемных и трепонемных тестов.

Источники:

1. Аковбян В.А., Прохоренков В.И., Новиков А.И., Гузей Т.Н. // Сифилис: Иллюстр. рук-во (Ред. В.И.Прохоренков). – М.: Медкнига, 2002. – С. 194-201.
2. Дмитриев Г.А., Фриго Н.В. // Сифилис. Дифференциальный клинико-лабораторный диагноз. – М.: Мед. книга, 2004. – С. 26-45.
3. Лосева О.К., Ловенецкий А.Н. Эпидемиология, клиника, диагностика и лечение сифилиса: Рук-во для врачей. – М., 2000.
4. Новиков А.И. с соавт. Вестерн-блот как подтверждающий тест в лабораторной диагностике сифилиса. – «Клин. лаб. Диагностика», 2011, № 8.– С. 4 -45.
5. Панкратов В.Г., Панкратов О.В., Навроцкий А.Л. и др. // Рецепт (приложение: Междунар. науч.-практ. конф. «Современные подходы к диагностике, лечению и профилактике инфекций, передаваемых половым путем», Гродно, 2005). – С.165-169.
6. Панкратов В.Г., Панкратов О.В., Крукович А.А. и др. // Здравоохранение. – 2006. – № 6. – С. 35-39.
7. Родионов А.Н. // Сифилис: рук-во для врачей. – СПб.: Питер, 1997. – С. 226-245.
8. Хурадо Р.Л. // ЗППП. – 1997. – № 3. – С. 3-10.
9. Шмидт Б.Л. // Первый Российский конгресс дерматовенерологов: Тез. науч. работ. – СПб., 2003.– Т. II. – С. 40-
10. Romanowski B., Sutherland R., Flick G.H. et al. // Ann. Intern. Med. –1991. – V. 114. – P. 1005-1009.Что такое серологическая диагностика сифилиса

Общая информация об исследовании

Возбудителем сифилиса является Treponema pallidum (бледная трепонема), бактерия из семейства спирохет.

Сифилис – венерическое заболевание: наиболее часто он передается половым путем. Кроме того, возможно заражение через кровь (например, при совместном использовании шприцев, бритв и пр.), плода от матери или бытовым путем (очень редко).

В международной классификации болезней выделяют врождённый, ранний и поздний сифилис, а также неуточненные формы. В медицинской литературе используются понятия первичный, вторичный и третичный сифилис.

Инкубационный период начинается с момента заражения и длится до первых симптомов (твердого шанкра) в среднем 21 день (от 10 до 90 дней).

Первичный сифилис – стадия с возникновения твердого шанкра до появления сыпи. Твердый шанкр – это язвочка, которая может появляться в том месте, где возбудитель проник в организм (обычно на половых органах). Он не болит и исчезает (без лечения) через 2-6 недель. Также на этой же стадии иногда увеличиваются лимфоузлы. В первое время заболевший человек остается серонегативным (т. е. в его крови еще нет антител против сифилиса).

Вторичный сифилис. Примерно через 4-8 недель после появления шанкра проявляются новые симптомы: сыпь и общее недомогание, температура, головная боль и др. Возможны и более тяжелые проявления.

Затем признаки сифилиса исчезают и заболевание переходит в латентную фазу. При этом возбудитель все же не покидает организм, поэтому при ослаблении иммунитета могут возникать рецидивы болезни. Их симптомы совпадают с проявлениями вторичного сифилиса.

Бывает, что сифилис так и остается в латентной форме. Но в ряде случаев, если человек не лечится, с годами развивается третичный сифилис. При этом поражаются различные органы и ткани: нервная и сердечно-сосудистая система, кости, суставы и др.

Для диагностики сифилиса часто используют серологические тесты (основанные на выявлении антител). Все виды анализов можно разделить на две группы: трепонемные и нетрепонемные тесты. Анализ на сифилис RPR относится к нетрепонемным.

Трепонемные тесты выявляют антитела, направленные конкретно против самих бактерий T. Pallidum, например сифилис РПГА (реакция пассивной гемагглютинации) или сифилис РИФ (реакция иммунофлуоресценции).

Посредством нетрепонемных тестов выявляют антитела против кардиолипина (липида, который входит в состав мембраны митохондрий и бактерий). Они появляются в организме человека со стадии первичного сифилиса (примерно через неделю после возникновения твердого шанкра). При нетрепонемных методах анализа на сифилис не различают тип антител (IgG, IgM или др.), а определяют суммарный ответ. К таким исследованиям относят микрореакции преципитации: RPR, VDRL и др.

При первичном и вторичном сифилисе чувствительность нетрепонемных тестов высокая (в случае RPR: 86 % при первичном, 100 % при вторичном), а чем выше чувствительность метода, тем больше вероятность, что тест выявит болезнь. Соответственно, если человек болен сифилисом, то результат теста со 100-процентной чувствительностью точно будет положительным.

Однако при использовании нетрепонемных тестов возможен и ложноположительный результат (выявление антител, несмотря на то что человек не болен сифилисом). Дело в том, что антитела против кардиолипина возникают не только при сифилисе, но и при некоторых других заболеваниях.

Поэтому при диагностике сифилиса нетрепонемный тест должен быть подтвержден с помощью более специфичного трепонемного.

У нетрепонемных тестов есть еще одна особенность. Антитела против кардиолипина появляются в острой фазе болезни. Поэтому, когда человек выздоравливает, их уровень снижается, так что по нему можно судить об успешности лечения.

Для чего используется исследование?

• Для первичной диагностики сифилиса.
• Чтобы оценить успешность лечения.

Когда назначается исследование?

• При скрининговом обследовании на сифилис. Обследоваться должны беременные женщины, доноры крови (и органов), представители некоторых профессий (врачи, работники сферы питания, люди, контактирующие с детьми, пациенты перед госпитализацией или хирургической операцией.
• При подозрении на сифилис (если у пациента есть симптомы сифилиса, генитальные язвы или другие половые инфекции, а также если его половой партнер болен сифилисом). В частности, когда ребенок родился от матери, больной сифилисом.
• После прохождения курса лечения от сифилиса.