Kam naudojamas fermentinis imunologinis tyrimas? ELISA kraujo tyrimas su indikatorių dekodavimu

Su fermentais susijęs imunosorbentinis tyrimas yra diagnostikos metodas, naudojamas vaikų ir suaugusiųjų helmintams nustatyti.

Indikacija atlikti

Gydytojai skiria ELISA invazijai šiais atvejais:

• leukocitų skaičius pacientui žymiai viršija normą, jei nėra kitų patologijų simptomų;
• nerimauja dėl dažno galvos svaigimo ar galvos skausmo be aiškios priežasties;
• atsiranda alerginių reakcijų;
• įveikti raumenų skausmas, nusilenkimas;
• kosulys neišgydomas ilgą laiką;
• kartais būna karščiuojanti būsena;
• naminiams gyvūnėliams aptinkamas kirminų buvimas;
• pablogėja epidemiologinė padėtis gyvenamajame regione;
• paciento profesija yra susijusi su didelė rizika infekcija su kirmėlėmis (planinė diagnostika).

• virškinimo sutrikimai su išmatų pasikeitimu ir jų dažniu;
• pilvo skausmas;
• diegliai kepenyse;
• pykinimas, virstantis vėmimu;
• centrinio pažeidimo požymių nervų sistema: nemiga, padidėjęs nervingumas, staigūs nuotaikų svyravimai.

ELISA tipai

Fermentinė reakcija leidžia ištirti laborantų nustatytus helmintų tipus vizualiai matuojant duomenis apie juos.

Praktika laboratorijose Skirtingos rūšys ELISA:

Kaip paimti

Kad tyrimo rezultatai būtų kuo patikimesni, reikia griežtai laikytis visų laboratorinių reikalavimų. Būtina:

• Likus 3 dienoms iki kraujo davimo, nustoti vartoti visus vaistus, išskyrus gyvybiškai svarbius;
• 2 dienoms sustabdyti kineziterapijos procedūras;
• 1 dienai atsisakyti alkoholio ir kavos;
• negalima atskleisti dieną prieš fizinė veikla ir emocinis stresas
• vakarieniauti ne vėliau kaip 19-20 val. (ryte galite atsigerti vandens).

Iššifravimas

Pasirinkimo numeris 1. IgM-, IgA+, IgG-: pirminė liga (2 savaites nuo užsikrėtimo).

2 variantas. IgM+, IgA+, IgG-: pirminė liga (2,5-3 savaitės nuo užsikrėtimo).

Pasirinkimo numeris 3. IgM+, IgA+, IgG+: pirminė infekcija (3-4 savaitės po užsikrėtimo).

Pasirinkimo numeris 4. IgM-, IgA+, IgG+: paūmėjimas lėtinės ligos(2 savaites nuo paūmėjimo pradžios).

Pasirinkimo numeris 5. IgM-, IgA+/-, IgG+: lėtinė fazė.

Pasirinkimo numeris 6. IgM-, IgA-, IgG+: išgydyta (praėjusi) infekcija, imuniteto buvimas.

Pasirinkimo numeris 7. Nenustatoma IgM-, IgA, IgG (arba titro sumažėjimas 2-4 kartus gydymo pabaigoje, 5-8 kartus po 1-1,5 mėnesio po gydymo): pasveikimas.

Pasirinkimo numeris 8. IgM-, IgA-, IgG-: imuniteto infekcijoms trūkumas.

Privalumai ir trūkumai

Labai retai testas duoda klaidingai teigiamų arba klaidingai neigiamų rezultatų. Šio trūkumo priežastys gali būti techninės klaidos. Tokie rezultatai galimi esant reumatoidiniam faktoriui, esant medžiagų apykaitos sutrikimams ir kt lėtinės ligos, dėl kurių gaminasi apsauginiai antikūnai, taip pat vartojant tam tikrus vaistus, pavyzdžiui, insuliną.

ELISA metodas nustato:

• kaspinuočiai (kiauliniai kaspinuočiai);
• apvaliosios kirmėlės (apvaliosios kirmėlės, pinworms, toksokaros, strongiloiditas);
• plokščiosios kirmėlės (cestodai, sraigės, nematodai);
• trichinelės;
• apvaliosioms kirmėlėms - 935 rubliai;
• iki toksoplazmos - 715-1000 rublių.

ELISA arba fermentinis imunologinis tyrimas - modernus būdas daugelio patologijų, įskaitant infekcines, apibrėžimai. Tyrimas atliekamas laboratorijoje. Pagrindinis technikos tikslas – aptikti antikūnus, jų buvimas rodo patogeninių medžiagų įsiskverbimą į organizmą. Šiuolaikinė medicina naudoja ELISA analizę daugeliui ligų diagnozuoti ir trečiųjų šalių junginiams nustatyti.

ELISA analizė: kada ir kaip ji atliekama

ELISA metodu specialistai gali nustatyti specifinių antikūnų (imunoglobulinų) buvimą kraujo serume ir nustatyti antigenus. Imunoglobulinai susidaro dėl sudėtingų nervinių procesų, kuriuos vykdo apsauginės organizmo funkcijos. Jie yra natūrali imuninės sistemos reakcija į svetimkūnių įsiskverbimą. Kiekvienam patogeno tipui gaminami specifiniai antikūnai.

Svarbu: esant tam tikriems kompleksams, fermentų imunologinio tyrimo metodas leidžia nustatyti patogeno tipą žmogaus organizme.

ELISA diagnozė atliekama siekiant nustatyti šias ligas:

• pūslelinė;
• virusinio tipo hepatitas;
• Epstein-Barr virusas (4 tipo herpesas);
• citomegalovirusas.

Kraujo tyrimas atskleidžia pagrindines patogenines bakterijas, kurios provokuoja sifilio, ureaplazmozės ir trichomonozės vystymąsi. Atlikdami analizę, ekspertai nustato antikūnus prieš 600 tipų alergenų. Laikymas fermentinis imunologinis tyrimas tinkamas ruošiantis organų transplantacijai.

Svarbu: kai kuriais atvejais ELISA yra papildomas metodas onkologijai žmogaus organizme nustatyti.

Analizė atliekama tik laboratorijoje. imami mėginiai tyrimams. veninio kraujo iš kubitalinės venos. Analizės rezultatai bus gauti kitą dieną. Norėdami gauti patikimos informacijos, ekspertai rekomenduoja laikytis pasirengimo ELISA taisyklių:

• vieną dieną prieš tyrimą būtina atsisakyti aštraus ir rūkytų maisto produktų vartojimo;
• alkoholis yra draudžiamas;
• kraujas duodamas ryte tuščiu skrandžiu;
• prieš tyrimą būtina pašalinti bet kokį fizinį ir emocinį stresą;
• patartina mesti rūkyti.

Kokios patologijos nustatomos fermentų imunologiniu tyrimu

Naudodamas fermentinį imunologinį tyrimą, specialistas nustato įvairių klasių imunoglobulinus, kurių buvimas rodo patologinių procesų vystymąsi organizme. Taigi, pagrindiniai ELISA rodikliai yra IgM ir IgG. IgM imunoglobulino buvimas rodo ūminės ligos vystymąsi patologinis procesas. IgG rodiklis kraujyje būdingas atsigavimo stadijai.

Atlikdami ELISA analizę, specialistai nustato keletą pavojingų ligų. Jie apima:

Svarbu: sifiliui patvirtinti skiriamas ELISA tyrimas, kai dovanojant kraują RV yra teigiamas rezultatas.

Laiku atlikta diagnozė leidžia sekti terapijos efektyvumą ir prireikus jį koreguoti.

Analizės iššifravimas: teigiamas ir neigiamas atsakymas

ELISA rezultatus interpretuoja specialistas, remdamasis gautais duomenimis. Atsakymas gali būti teigiamas arba neigiamas.

Teigiamas ELISA

Rezultatas laikomas teigiamu, jei tyrimo metu kraujyje buvo aptikta IgG ir IgM klasių imunoglobulinų. Pateiktų komponentų buvimas rodo šių ligų vystymąsi:

• sifilis;
• virusinio tipo hepatitas;
• CMVI (citomegalovirusas);
• pūslelinė;
• vėjaraupiai;
• ligos, kurias sukelia stafilokokai ir streptokokai;
• chlamidija.

Išsivysčius sifiliui, specifiniai antikūnai kraujyje randami praėjus 14 dienų po užsikrėtimo. Pagal jų skaičių specialistas nustato ligos eigos sunkumą. Aktyvi sifilio terapija pašalina visas bakterijas po 6 mėnesių. Jei nėra gydymo, visiškas atsigavimas organizmas užtruks mažiausiai 1,5 metų.

ELISA analizė atskleidžia virusinio tipo hepatitą net ir inkubacinis periodas prieš pasireiškiant pirmiesiems simptomams.

CMVI yra dažna patologija, kuri pasireiškia kas trečiam asmeniui. Gyventojams tai nekelia pavojaus, infekcija atsiranda gimdoje.

Paprastai antikūnai prieš herpetinis virusas nėra žmogaus organizme. Jas nustačius, įprasta diagnozuoti ūminę ligos fazę.

Vystantis vėjaraupiams žmogaus kraujyje randami specifiniai IgM imunoglobulinai. Jie gali išlikti organizme 2 metus, visiškai pašalinus patologiją.

Norint nustatyti streptokokų ir stafilokokų sukeltas ligas, galima atlikti dvigubą ELISA tyrimą. Pakartotinai ištyrus specifinių antikūnų lygis sparčiai didėja.

Rodo chlamidijų vystymąsi aukštas lygis imunoglobulinas - 1:8 ir daugiau. Indikatorius gali skirtis priklausomai nuo ligos progresavimo.

Dėmesio: tam, kad patvirtintų tam tikro patologinio proceso išsivystymą, specialistas skiria papildomą laboratorinį ir instrumentiniai tyrimai. Išsamus tyrimas leidžia priskirti veiksminga schema gydymas.

Neigiamas ELISA

Esant neigiamam rezultatui, specifiniai IgM klasės imunoglobulinai žmogaus kraujyje neaptinkami. Galbūt IgG buvimas, antikūnai gali likti organizme po to praeities ligos, bakterijų ir virusų tipai. Kai kuriais atvejais jų buvimas kraujo serume išlieka dešimtmečius.

Dėmesio: teisingai iššifruoti analizės rezultatus gali tik patyręs specialistas.

Savarankiškas atsakymų tyrimas daugeliu atvejų sukelia bandymus diagnozuoti ir paskirti neteisingą gydymą, nedalyvaujant gydytojui. Toks poveikis laikomas idealiu tolesniam patologinio proceso progresavimui.

Fermentinis imunologinis tyrimas (ELISA) yra laboratorinis tyrimas, pagrįstas specifiškumu ir aukštas laipsnis imunologinės reakcijos „antigenas-antikūnas“ selektyvumas. Įprasta išskirti kelias dešimtis ELISA variantų. Populiariausias yra heterogeninis kietosios fazės imunologinis tyrimas arba ELISA (enzyme linked immunosorbent assay).

Ryžiai. vienas

ELISA naudojama dviem tikslais: jei reikia, nustatyti bet kokios infekcijos sukėlėjo antigenus arba (kas praktikuojama daug dažniau) nustatyti IgA, IgM, IgG klasės antikūnų prieš antigeną buvimą. ligos sukėlėjo. ELISA metodu nustatomi beveik bet kokios seksualinės infekcijos antikūnai.

Fermentinio imunosorbento tyrimo principas grindžiamas imunine antigeno reakcija su antikūnais, kai prie antikūnų priklijuodamas fermento ženklą tyrėjas nustato antikūno-antigeno reakcijos rezultatus, fiksuodamas antikūno atsiradimą ar pasikeitimą. fermentinio aktyvumo lygis.

Pirmoji reakcija stebima tarp išgryninto patogeno antigeno (Ag) ir nustatyto Ig (Ab), pritvirtinant prie imunologo plokštelės šulinių plokštumos.

Antroji imunologinė reakcija atliekama siekiant nustatyti besiformuojančius imuninius kompleksus. Specifinis surištas Ig čia naudojamas kaip antigenas, o tam naudojamas konjugatas su antikūnais – Ig (Ab) prieš specifinį žmogaus Ig, kuris yra paženklintas fermentu K (peroksidaze). Toliau vykstančią fermentinę reakciją katalizuoja fermentinė konjuguotos molekulės dalis. Kaip reakcijos substratas naudojama bespalvė medžiaga, vadinama chromogenu, reakcijos metu chromogenas įgauna spalvą. Imunoglobulino kiekis mėginyje nustatomas pagal šulinėlio dažymo intensyvumą.

Pasibaigus reakcijai, atliekama šulinio fotometrija, rezultatai registruojami specialiu prietaisu. Matematinis tyrimo rezultatų apdorojimas parodo būdingų antikūnų buvimą ir kiekį mėginyje.

Serodiagnostikai naudojama 96 šulinėlių polistireno plokštelė, kurios šoniniuose ląstelių paviršiuose iš anksto adsorbuojamas antigenas. Kai tiriamasis serumas įvedamas į tabletės ląsteles, prie antigeno prisijungia jam homologiški antikūnai. Tada į duobutes dedami fermentu pažymėti antikūnai prieš žmogaus antikūnus (imunoglobulinai). Jei tiriamajame serume yra aptinkamų antikūnų, jie bus rodomi kaip antigenai, su kuriais reaguos pažymėti antikūnai. Po plovimo pridėtas chromogenas (dažiklis) leis fiksuoti reakciją būdingu ląstelių dažymu. Tokios spalvos intensyvumas bus proporcingas fermento proporcijai ir atitinkamai antikūnų kiekiui.

Išmatavus ląstelėje esančio skysčio optinį tankį (OD) ir palyginus jį su šabloniniu mėginiu, apskaičiuojama antikūnų koncentracija tūrio vienete. Dažniausiai rezultatas skaičiuojamas OP vienetais. Būdinga tai, kad kiekviena tyrimo sistema turi savo patologijos ir normų rodiklius, taip pat rezultatų apskaitos rodiklius, į kuriuos reikėtų atsižvelgti interpretuojant rezultatus.

Šiuolaikinė venerologija naudoja fermentų imunologinį tyrimą, diagnozuojant sifilį, virusinis hepatitas, ŽIV infekcija. Taip pat ELISA yra naudojamas diagnozuoti citomegalovirusines ir chlamidines infekcijas, herpetinės kilmės infekcijas. Taikant fermentinį imunologinį tyrimą, nustatomi antikūnai įvairioms infekcinėms ligoms, hormonų lygis, onkologiniai žymenys, autoantikūnai.

Yra žinoma, kad pirminės lytinių organų infekcijų diagnostikos metu nerekomenduojama nustatyti antikūnų buvimo ir kiekio kraujyje. Šiuo atveju apeliacija į fermentinį imunologinį tyrimą būtų visiškai pagrįsta. ELISA yra gana pajėgi atpažinti sifilį. Reikėtų tik atsiminti, kad antikūnų buvimas serume rodo tik organizmo kontaktus su patogenais praeityje arba šiuo metu.

Valerija 2018-08-22 16:01:18

MRT yra silpnai teigiamas, o prieš 8 mėnesius buvo gydomas sifilis. Kodėl gali būti toks rodiklis?

Kreipkitės į sifilidologą. Sifilio išgydymui kontroliuoti atliekamos kompleksinės analizės (RPGA, imunoblotas). Ir šios diagnozės „pėdsakai“ analizėse gali būti daug metų.

sanya 2018-08-19 13:02:00

ifa 1-40 yra teigiamas, o etaloninis neigiamas anksčiau sirgo ir buvo gydomas, ką tai reiškia?

Menščikova Galina Vladimirovna Dermatovenerologė, dermatoonkologė. medicinos mokslų kandidatas. Pirmos kategorijos gydytojas. Daugiau nei 15 metų patirtis:

ELISA kokiai infekcijai? Nurodykite.

Irina 2018-07-25 12:39:58

Laba diena! 2002 m. su vyru susirgome pirminiu sifiliu. Šiuo metu esu nėščia. Išlaikėme tyrimus: RMP neigiamas, IgM neigiamas, IgG neigiamas, IFA teigiama, RPHA 4+. Daktaras pasake ko tau reikia profilaktinis gydymas ACV 20 savaitę 6 injekcijos per dieną 10 dienų. Prašau pasakyti, ar turiu indikacijų tokiam rimtam gydymui.

Bagaeva Madina Dermatovenerologė, Maskvos dermatovenerologų ir kosmetologų draugijos narė. A. I. Pospelova atsako:

Tai labai subtilus momentas, nes nėštumo metu klaidingai teigiami testai. Būtina sifilidologo konsultacija.

(nuoroda į 3-ąjį šio failo straipsnį), leidžiantis įvertinti organizmo atsparumą infekcinėms ligoms ir parodantis ligos fazę, svarbią vietą užima fermentinis imunologinis tyrimas (ELISA). Šio tyrimo atlikimas leidžia visapusiškai įvertinti apsauginės kraujo funkcijos aktyvumą ir nustatyti imunodeficito būklę infekcinės patologijos, taip pat kraujo ligos, autoimuniniai procesai, hormoninės problemos.

Kaip vienoje analizėje įmanoma apimti tiek daug tikslų ir kokios jos įgyvendinimo indikacijos? Pabandykime tai išsiaiškinti.

Kas yra ELISA kraujo tyrimas?

Tai laboratorinis tyrimas, leidžiantis nustatyti specifinių antikūnų (baltyminio pobūdžio apsauginių kraujo faktorių) prieš tam tikrus antigenus (patogeninius agentus) buvimą. Tarp svarbiausių antikūnų yra imunoglobulinai, kurie gali egzistuoti imunokompleksų pavidalu.

Imunoglobulinai susidaro dėl sudėtingų žmogaus neurohumoralinių reakcijų, atsirandančių kaip atsakas į svetimų antigenų patekimą. Kiekvienas patogeno tipas gamina savo specifinius antikūnus. Jie veikia „surišdami“ antigeną arba patologinį mikroorganizmą, sudarydami „antigeno-antikūno“ kompleksinį junginį, po kurio vyksta neutralizavimas, fermentinė lizė, fagocitozės reakcijos ir pašalinimas iš organizmo.

Pastaba:būtent pagal tam tikrų kompleksų buvimą ELISA metodas nustato paciento patogeno ar kenksmingos medžiagos tipą.

Pagrindinius žmogaus imuniteto veikimo principus galite sužinoti peržiūrėję šią vaizdo įrašo apžvalgą:

Kas yra imunoglobulinai

Atrastos ir ištirtos 5 pagrindinės imunoglobulinų klasės – IgA, IgM, IgG, IgD, IgE. likusiųjų vaidmuo dar nėra iki galo išaiškintas ir jie yra mokslinių tyrimų stadijoje.

Pastaba:praktinėje medicinoje svarbiausi yra A, M ir G klasių imunoglobulinai. Apibrėžimo informatyvumas grindžiamas skirtingais jų atsiradimo, maksimumo ir išnykimo laiko intervalais.

Panagrinėkime šį klausimą išsamiau.

Pagrindinė užduotis imunoglobulinas A (IgA) yra apsauginė gleivinių funkcija kvėpavimo takai, virškinimo trakto ir šlapimo sistema. Ūmiai prasidėjus ligai, jų nustatyti neįmanoma. Šie apsauginiai kompleksai atsiranda tik nuo 2-osios ligos pradžios savaitės, kartais vėliau. Didžioji dalis imunoglobulino A yra sutelkta gleivinės audiniuose. Maždaug apie 80 proc. Likę antikūnai cirkuliuoja kraujyje. Pagrindinė funkcija yra mikroorganizmų neutralizavimas ir sunaikinimas. Po nusėdimo ūminės apraiškos liga, šių imunoglobulinų skaičius pradeda mažėti ir visiškai išnyksta iki 8 savaičių nuo ligos pradžios. Jei IgA randama daugiau nei vėlyvos datos, tai rodo proceso chronizavimą.

Pagrindiniai ir pirmieji žymekliai ūminė fazė besivystanti patologija yra M klasės imunoglobulinai (IgM). Jie nustatomi 5 dieną nuo negalavimo pradžios. Jų buvimą kraujyje galite nustatyti maždaug 6 savaites. Tada jie pradeda greitai išnykti.

Likęs imuninis atsakas apibūdina buvimą kraujyje G klasės imunoglobulinai (IgG). Šių veiksnių atsiradimas kraujyje nustatomas praėjus maždaug mėnesiui nuo ligos pradžios. Ateityje jie gali būti nustatyti daugeliui mėnesių, metų ir net visam gyvenimui, atliekant apsauginė funkcija nuo ligos grįžimo (atkryčio), o kai kuriais atvejais tai tampa neįmanoma antrinis vystymasis patologija. Jei imunoglobulino G kiekis vėl pradėjo didėti, galima įtarti pakartotinę infekciją. Panašią išvadą galima padaryti paimant du ar tris mėginius su 2 savaičių intervalu.

Imunoglobulinas D (IgD) yra ant B limfocitų, yra nedidelė koncentracija sveikų žmonių. Po 10 metų gyvenimas pasiekia maksimalias vertes. Imunoglobulino D kiekis padidėja nėštumo metu, pacientėms sisteminės ligos jungiamasis audinys, ligos, kurias sukelia imunodeficitas.

Fermento imunologinio tyrimo paskyrimo indikacijos

Antikūnų prieš patogeninių mikrobų buvimą organizme, kurie sukelia:

• trichomonozė;
• ureaplazmozė ir.

Padidėja imunoglobulinų skaičius ir su.

Diagnostika atliekama siekiant nustatyti:

• herpetinės ligos;
• virusinio hepatito grupės;
• Epstein-Barr virusas;
• citomegalovirusas.

ELISA pagalba galima nustatyti antikūnų buvimą prieš 600 tipų alergenų, nustatyti imunodeficito būklę, atlikti išsamus tyrimas prieš transplantacijos operaciją sudėtinga analizė apie gydymo veiksmingumą.

ELISA yra papildomas metodas vėžio ląstelių aptikimas.

Kaip atliekamas kraujo ELISA tyrimas?

Su fermentu susietam imunosorbentiniam tyrimui dažniausiai naudojamas pacientų kraujas, kartais paimamas audinys. stiklakūnis kūnas, stuburo kanalo skystis, vaisiaus vandenys.

Kraujas per injekcinę adatą paimamas į švirkštą iš kubitalinės venos. Tyrimas atliekamas tuščiu skrandžiu. Reikėtų prisiminti, kad kai kurių medicininiai preparatai gali turėti įtakos analizės rezultatui. Prieš duodami kraują, turite susilaikyti nuo rūkymo, alkoholio vartojimo. Narkotinių medžiagų vartojimas gali iškreipti rezultatus.

Esant neigiamoms reikšmėms imunoglobulinai IgM, IgG, IgA, galime kalbėti apie ligos nebuvimą ar pradinę jos fazę, taip pat su minusais galimas rezultatas visiškas atsigavimas pasibaigus reikšminga suma laikas.

Jei IgA ir IgM neaptikti, o IgG yra teigiamas, tada labai tikėtina Mes kalbame apie susiformavusį imunitetą po infekcinė liga arba po vakcinacijos.

Kada aukštas titras IgM su neigiamu IgG reikšmės, IgA galima daryti išvadą apie ūminės infekcinės ligos buvimą.

Vienalaikis teigiamas vertes imunoglobulinų – IgA, IgM, IgG rezultatai būdingi ūmiai esamos lėtinės ligos atkryčio fazei.

Dėl lėtinė infekcija ELISA, kuri yra proceso remisijos fazėje, rodo neigiamas imunoglobulino M (IgM) reikšmes, o imunoglobulinų G (IgG) ir A (IgA) rezultatas bus teigiamas.

Fermentinio imunologinio tyrimo metodo privalumai

Pagrindiniai ELISA metodo pranašumai yra šie:

• maža analizės kaina;
• diagnostikos specifiškumas, tikslumas;
• dinaminė kontrolė (pakartotinė analizė, siekiant nustatyti gydymo efektyvumą ir ligos stadijas);
• galimybė atlikti masinius infekcijos židinių tyrimus;
• rezultato gavimo greitis;
• santykinis analizės paprastumas;
• naudojimo galimybė informacines technologijas perdirbant;
• saugumas ir neskausmingumas pacientui.

Ar yra kokių nors kraujo ELISA trūkumų?

vyr neigiamas momentas tyrimas yra galimybė gauti klaidingai neigiamus ir klaidingai teigiamus duomenis. Nesusipratimų priežastis gali būti techniniai trūkumai, vaistų vartojimas, o tai gali iškreipti vaizdą.

ELISA naudojama siekiant nustatyti:

• (ascaris, pinworms);
• ūminės ir lėtinės opisthorchiazės formos;
• trichineliozės;
• lamblijos buvimas (kaip papildoma analizė);
• leišmaniozės formos;
• amebiazė;
• toksoplazmos kiekis;

Apibendrinant reikia pažymėti, kad šiuolaikinė imunologija nuolat tobulėja, ieško naujų ligų diagnostikos ir gydymo metodų.

Stepanenko Vladimiras, chirurgas

Vystymas šiuolaikinė medicina diagnostikos pasaulyje nenustoja stebinti savo pasiekimais ir dabar gydytojui nereikia daryti prielaidų dėl galimos diagnozės, pasikliaujant tik netiesioginiai ženklai. Kūrimas ir pažintis su pasauliu laboratoriniai tyrimai Imunofermentinis tyrimas (ELISA) leidžia greitai ir tiksliai nustatyti ne tik patogeno buvimą, bet ir daugelį kitų ligos požymių.

IFA kūrimo ir plėtros istorija

Šis metodas kraujo tyrimai praktinėje medicinoje pradėti naudoti praėjusio amžiaus viduryje – kažkur 60-aisiais. Pirminė jos paskirtis buvo Moksliniai tyrimai histologijos srityje, kurios apsiribojo biologinių rūšių ląstelinės antigeninės struktūros paieška ir tyrimais. ELISA kraujo tyrimas pagrįstas susijusių antigenų (AG) ir specifinių antikūnų (AT) sąveika, susidarant „antigeno-antikūno“ kompleksui, kurį nustato fermentas.

Šis reiškinys paskatino mokslininkus nuspręsti, kad šiuo metodu galima atpažinti įvairių klasių baltymų junginius, kurie susidaro kraujo serume patogenui patekus į organizmą. Dėl tiesioginio dalyvavimo imuninės sistemos veikloje šie junginiai buvo pavadinti imunoglobulinais (Ig, Ig), o atradimas buvo didžiausias proveržis laboratorinėje diagnostikoje.

Tuo pačiu metu šis labai jautrus metodas buvo pradėtas aktyviai naudoti tik devintajame dešimtmetyje ir buvo prieinamas tik labai specializuotuose gydymo įstaigos. Stotys ir kraujo perpylimo centrai, venerinių ir infekcinių ligų ligoninės buvo pirmosios, kuriose atsirado galimybė naudoti fermentų imunologinius analizatorius. Tai lėmė sparčiai plintantis „XX amžiaus maras“ – AIDS, todėl prireikė skubių diagnostinių ir terapinių priemonių.

Technikos galimybės

ELISA kraujo tyrimo apimtis gana plati – šiuo metu neįsivaizduojama, kaip sunku būtų ieškoti daugelio ligų priežasčių. Toks tyrimas dabar taikomas beveik visose medicinos šakose, net ir onkologijoje. Nors neinformuotiems sunku suprasti, kai kuriais atvejais jį atlikus pavyko išgelbėti pacientų gyvybes radus naviką. ankstyvosios stadijos.

Svarbu! ELISA – tai kraujo tyrimas, parodantis kai kuriems piktybiniams procesams būdingus žymenis, leidžiančius aptikti ligą toje stadijoje, kai jai netaikomas joks kitas metodas.

Šiuolaikinėje diagnostikos centrai, laboratoriniai tyrimai atstovauja ne tik navikų žymenys – juose įrengtas įspūdingas šios diagnozės skydelių arsenalas. Jie gali būti naudojami rinkiniui apibrėžti patologinės būklės, pvz., hormoniniai sutrikimai ir įvairios kilmės infekciniai procesai.

Be to, ELISA kraujo tyrimo atlikimas ir iššifravimas leis stebėti vaistų poveikį sergančio žmogaus ir net gyvūno kūnui. Pastarasis yra plačiai naudojamas veterinarijos klinikos padėti išlaikyti mūsų augintinių ar maitintojų sveikatą, užtikrinti stabilų mėsos, pieno produktų ir kiaušinių tiekimą, nepakeičiamą mityboje.

Taigi, paėmęs vos kelis mililitrus veninio kraujo ir diagnozavęs jį ELISA metodu, gydytojas, aprašęs tyrimo medžiagą, galės nustatyti:

• hormoninė būklė, įskaitant biologinę veikliosios medžiagos seksualinės ir Skydliaukė, taip pat antinksčių liaukos;
• bakterijų buvimas ir virusinė infekcija(hepatitas B ir C, sifilis, pūslelinė, chlamidija, tuberkuliozė, miko- ir ureaplazmozė, ŽIV, TORCH) ir kitos tokio pobūdžio ligos;
• patologinio proceso patogenų gyvybinės veiklos požymiai, kurie baigėsi atsigavimu ir perėjo į antikūnų susidarymo stadiją (imuninis atsakas).

Tokius kompleksus daug lengviau atpažįsta ir pašalina imuninės ląstelės. Liekamieji reiškiniai antikūnų pavidalu daugeliu atvejų kraujyje yra visą gyvenimą, o tai praktiškai sumažina pakartotinio užsikrėtimo riziką iki nulio.

Imunoglobulinų veislės

Yra keletas antikūnų tipų, ir kiekvienas iš jų tam tikrame etape dalyvauja imuninio atsako procese. Pavyzdžiui, M klasės imunoglobulinai (IgM) yra pirmieji, kurie susidaro reaguojant į antigeno patekimą į organizmą. Didžiausias jų rodiklis stebimas pirmosiomis ligos dienomis.

ELISA naudojami imunoglobulinų tipai

Tada imuninę sistemą paleidžia į plazmą IG klasę G (IgG), atsakingą už visišką antigenų sunaikinimą ir paciento pasveikimą. Vėliau jie ir toliau yra kraujyje, taip paruošdami imuninę sistemą identiško patogeno pakartotiniam patekimui. Taip veikia vakcinacija. Įvedus susilpnėjusius patologinių mikroorganizmų antigenus, daug imunoglobulinų atsiranda plazmoje ir lieka cirkuliuoti.

Pagrindiniai dominantys objektai laboratorinė diagnostika Nagrinėjamos Ig klasės M, G ir A. Pagal jų koncentracijos lygį galima nustatyti ligos stadiją ir sužinoti, kokiomis infekcinėmis ligomis žmogus sirgo gyvenime. Pavyzdžiui, galite patikrinti, ar buvo istorija vėjaraupiai arba raudonukė. gydytojas patikrins, ar yra tam tikros rūšies AT ar AH paciento organizme ar kokio nors hormono koncentracija, nereikia skirti kelių laboratorinių tyrimų – užtenka išrašyti siuntimą ELISA tyrimui.

Technikos esmė

Tyrimo metodika paremta keliais užduočių variantais (tiesioginiu ir netiesioginiu – konkurenciniu ir nekonkurenciniu), kurių kiekvienas yra skirtas konkretiems tikslams. Šis metodas leidžia atlikti tikslinę paiešką ir per trumpiausią įmanomą laiką nustatyti konkrečios patologijos priežastį. Įvairių klasių kategorijų Ig aptikimui naudojama 96 šulinėlių plokštelė (polistireno plokštė), kurios duobutėse yra adsorbuoti rekombinantiniai baltymai. Jie veikia kaip antigenai Pradinis etapas yra kietoje fazėje.

Kai jie patenka į šulinį su kraujo plazma, antigenai arba antikūnai identifikuoja objektą, susijusį su jų orientacija, ir sudaro kompleksą (AG - AT). Šis darinys fiksuojamas fermento junginiu (konjugatu), kuris vėliau pasireiškia kaip pakitęs šulinio dažymas. ELISA atliekama naudojant specialias testavimo sistemas, pagamintas specializuotose laboratorijose ir aprūpintas visu reagentų rinkiniu.

Šią analizę galima atlikti su poveržlėmis ir rodmenų spektrometrais, tačiau jiems reikia rankų darbo. Žinoma, laboratorijos padėjėjui kelis kartus patogiau ir greičiau atlikti visas manipuliacijas visiškai automatizuotais įrenginiais. Jas naudojant, laboratorijos darbuotojai atleidžiami nuo didelio monotoniškos veiklos – prausimosi, lašinimo ir likusios rutinos, bet ne visos gydymo įstaigos gali sau leisti tokią brangią įrangą

Todėl daugelis ligoninių ir diagnostikos įstaigų ELISA ir toliau atlieka senamadiškai – pusiau automatiniais prietaisais.

Tyrimų medžiagos interpretavimas yra išskirtinai laboratorinės diagnostikos specialisto kompetencija – tik jam gali būti pasakomi rezultatai apie ligos eigos specifiką ir subtilybes. Tokiu atveju gydytojas būtinai turi atsižvelgti į galimybę gauti klaidingai neigiamus arba klaidingai teigiamus atsakymus.

Medžiagų transkripcija

Kokybiško fermentinio imunologinio tyrimo rezultatas turėtų būti neabejotina išvada – ar šiame kraujo mėginyje rastas norimas mikroorganizmas, ar ne. Kiekybinė analizė parodys koncentracijos lygį ir gali būti išreikštas dviem būdais – reikšmė skaičiais arba „+“ ženklų skaičiumi.

Analizuojami rodikliai

Tyrimo metu atliekamas išsamus pagrindinių imunoglobulinų, dalyvaujančių imuniniame atsake, tyrimas, pavyzdžiui:

• IgM – šios klasės aptikimas reiškia vystymąsi ūminė forma infekcinė liga. Neigiamas IgM paieškos rezultatas gali būti ir norimo patogeno nebuvimo įrodymas, ir ligos perėjimas į lėtinę eigą.
• IgA - šios klasės apibrėžimas, kai IgM nėra, daugeliu atvejų signalas apie lėtinį ar latentinė forma plėtra infekcinė liga.
• IgM ir IgA (vienu metu) teigiamų rezultatų abiem rūšims rodo patį ūminės patologijos formos piką.
• IgG - jo buvimas rodo ligos transformaciją į lėtinė forma arba sveikimui ir imuniteto nustatymui sukėlėjui susidaryti.

Tam tikros IG klasės atsiradimas ir kaupimasis vyksta skirtingais laiko etapais. Taigi, pavyzdžiui, IgM atsiranda pirmiausia, praėjus maždaug 5 dienoms po patogeno patekimo. IG kraujyje išlieka apie 5–6 savaites, o vėliau palaipsniui išnyksta. Šiuo metu juos galima nustatyti ELISA metodu. Maždaug po 3-4 savaičių nuo ligos pradžios atsiranda IgG, kuris vėliau gali išlikti kelis mėnesius. Tačiau analizuojant juos ne visada įmanoma aptikti.

IgA kraujyje susidaro per 2-4 savaites, 20 % jų yra serume, 80 % – gleivinės sekrete. Paprastai šie imunoglobulinai išnyksta per 2–9 savaites, o tai rodo patogeno sunaikinimą ir paciento pasveikimą. Jei ELISA vis dar rodo IgA buvimą, tai rodo proceso perėjimą į lėtinę formą.

Analizės rezultatų parinktys

Atsižvelgiant į gautus duomenis, ELISA atsakymai gali būti pateikiami formoje lentelės su pilnas sąrašas visi AT ir AG ir teigiamo arba indikacija atsakas. AT tam tikros situacijos bus rodoma kiekybinė reikšmė – ryškiai teigiamas, teigiamas, silpnai teigiamas arba neigiamas rezultatas. Antrasis variantas rodo antikūnų kiekį tiriamame kraujo mėginyje.

ELISA medžiagų interpretavimo variantai

Be minėtų verčių, ELISA procese tiriamas dar vienas kiekybinis parametras – AT avidumo indeksas, skaičiuojamas procentais. Tai parodo, kiek laiko trunka liga – tai yra, kuo rodiklis didesnis, tuo patologija vystosi ilgiau.

Alternatyvus ELISA metodas

Su fermentais susijęs imunosorbentinis tyrimas yra gana gerai žinoma ir dažna diagnozė. Galbūt kai kurie niekada apie tai negirdėjo, tačiau yra dar viena, daugeliui žmonių mažiau žinoma atmaina. Šis tyrimas kuriame imamas ne kraujo mėginys. Ši technika vadinama slapto kraujo išmatų tyrimu ir daugeliu atvejų leidžia išvengti papildomų sekinančių procedūrų, kurias lydi nemalonūs pojūčiai.

Slaptojo kraujo (hemoglobino molekulių) ELISA analizė leidžia nustatyti organų kraujavimą Virškinimo sistema, net ir nežymūs, kurių požymių paciento išmatose, kaip sakoma, plika akimi aptikti nepavyksta. Susietas imunosorbento tyrimas paslėptas kraujasžmogaus išmatose per trumpą laiką gali parodyti pepsinė opa, polipozė, divertikuliozė, navikai, kurių ankstyvosiose stadijose nėra tam tikrų simptomų.

Iki šiol buvo sukurta tūkstančiai įvairių fermentų imunologinių tyrimų diagnostinių testų sistemų, kurios suteikia galimybę rasti AT ir AG iš didžiulio patologijų sąrašo. Taigi šią analizę Jis naudojamas beveik visose medicinos srityse, bet kuriai amžiaus grupei. Ir absoliutus nekenksmingumas leidžia jį naudoti tiek nėštumo metu, tiek diagnozuojant nusilpusius pacientus.